Сравнительное антибактериальное действие средств дезинфекции бытовых помещений

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ 
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования 
«Самарский национальный исследовательский университет имени академика С.П. Королева»
КАФЕДРА БИОХИМИИ, БИОТЕХНООГИИ И БИОИНЖЕНЕРИИ

Сравнительное антибактериальное действие средств дезинфекции бытовых помещений
Выпускная квалификационная работа 
по направлению подготовки 06.03.01 Биология



«ДОПУЩЕНА К ЗАЩИТЕ»
Заведующий кафедрой биохимии, биотехнологии и биоинженерии д.б.н., профессор 
___________________ Ревин В.В.

«___»__________________2016г.





Выполнил студент 4 курса
Арсеньев Юрий Сергеевич
Подпись________________
Научный руководитель -
доктор биологических наук, профессор
Клёнова Наталья Анатольевна
Подпись________________
Выпускная квалификационная работа защищена
«___»________________2016г.

Оценка_______________

Председатель ГЭК
Подпись______________



Самара
2016
СОДЕРЖАНИЕ
Введение……………………………………………………………………...……
1. Обзор литературы………………………………………………………………
1.1. ……………………………………………………………………..
1.2. ……………………………………………………………………..
1.3. ……………………………………………………………………..
1.3.1 ………………………………………………………………………
1.3.2 ……………………………………………………………………….
1.3.3 ………………………………………………………………………..
1.4. ………...............................................................................................
2. Экспериментальная часть……………………………………………………
2.1. Объект и методы исследования……………………………………………
2.2. Результаты исследования и их обсуждение……………………………….
Выводы…………………………………………………………………………...
Список используемых источников и литературы……………………………..
Приложение 1….………………………………………………………………....








Введение
     
     Дезинфекция – удаление или уничтожение возбудителей болезней (инфекционных и паразитарных)на объектах окружающей среды. Производится с целью уничтожения возбудителей инфекционных заболеваний.
     В настоящее время существует большое количество дезинфекционных средств, содержащих основные активные вещества в различных пропорциях и комбинациях. Дезинфекция является мероприятием, направленным на разрыв связей между звеньями эпидемического процесса, используется как с профилактической, так и с противоэпидемической целью в борьбе с инфекционными болезнями. (Покровский В.И. и соавт., 2000).
	Ежегодно как в нашей стране, так и за рубежом неуклонно увеличивается количество веществ, испытываемых на биологическую активность, причем исследователи обращаются как к новым классам химических соединений, так и к ранее известным препаратам на их основе. В большинстве случаев скрининг антимикробных веществ осуществляется эмпирическим путем,  поскольку не подвергать такому изучению уже синтезированные для нужд народа химические соединения было бы не оправданным.
     Наибольшее применение в качестве дезинфицирующих средств в последние годы нашли препараты на основе групп химических соединений: галоидсодержащие, поверхностно активные соединения (ПАВ), среди которых наиболее популярны катионные (КПАВ) и амфолитные ПАВ, фенол и его производные, перекисные соединения и альдегиды. ( 11! Стр7)
     Бытовые помещения посещают различные люди, причем, количество посетителей часто достаточно большое, если это касается общественных мест. Поэтому всегда есть риск либо заразиться каким-то инфекционным заболеванием, либо стать причиной распространения эпидемии. Возникает вопрос о выборе наиболее эффективного дезинфицирующего средства для бытовых помещений.Escherichiacoli M 17/p Colapи Staphylococcusaureus № 6538-р. 

     Целью исследованиястал сравнительный анализ влияния различных концентраций бытовых дезинфицирующих средств на рост Escherichiacoli и Staphylococcusaureus.
     Были поставлены следующие задачи:
1. Определить минимальную концентрацию различных дезинфицирующих средств, подавляющую ростEscherichiacoli;
2. Определить минимальную концентрацию различных дезинфицирующих средств, подавляющую рост Staphylococcusaureus;
3. Провести сравнительный анализ антибактериального действия дезинфицирующих средств с разными составами: «DOSIA», «SANITA», «COMET», «SARMA», «Туалетный утенок».
     Научная новизна работы состоит в том, что было проведено сравнительноеисследование антибактериального действия средств дезинфекции бытовых помещений, легкодоступных для населения.
     Практическая значимость работы заключается в том, чтополученные данные указывают на эффективность различных бытовых средств, купленных в магазине, откуда можно сделать вывод о соотношении цены и качества средств различных торговых марок и наиболее эффективном составе.
     
     

     1. Обзор литературы
1.1. Дезинфекция
     Дезинфекция – методы и средства уничтожения болезнетворных микроорганизмов на путях передачи от источника инфекции к здоровому организму. Основная задача дезинфекции – прерывание механизма передачи инфекции обеззараживанием различных объектов (вода, пищевые продукты, предметы бытовой обстановки и др.). 
     Обычно дезинфекцию проводят в лечебных учреждениях и квартирах для предупреждения рассеивания возбудителей болезни от больного к окружающим и на предметы бытовой и производственной обстановки. Дезинфекция должна быть максимально приближена к моменту выделения возбудителя из организма больного. При проведении дезинфекция широко применяют камерное обеззараживание, кипячение влажную обработку вещей помещений и мебели раствором химических препаратов.
     
     1.2.2.Методы дезинфекции
     Объекты, подлежащие дезинфекции, отличаются друг от друга по их назначению и применению, по степени их зараженности, по своей значимости, структуре и консистенции, химическим и физическим свойствам, по плотности, по месту расположения и биологической форме возбудителей инфекции.
Различают:механический; физический; биологический;химическийметоды дезинфекции ( стр).
     Механический методы. 
     Основу механического метода составляют: чистка предметов, влажная уборка, стирка, фильтрация, вентиляция и др. Достоинством механического метода дезинфекции является его простота и доступность для выполнения, однако этим методом можно лишь снизить микробную контаминацию объекта, но полного обеззараживания достичь невозможно.
     Физический методы. 
     Физические методы дезинфекции подразумевают воздействие (уничтожение) на микроорганизмы различными физическими факторами. Это может быть кипячение, прокаливание, обжигание, воздействие солнечным светом, применение ультрафиолетового излучения, обдув горячим воздухом, глажка, высушивание, использование водяного пара, высушивание и даже сжигание. Как видно из перечня основным физическим методом служит термообработка, это обусловлено тем, что микроорганизмы не способны выдерживать высокие температуры.
     Биологический методы. 
     Уничтожение возбудителей инфекционных болезней во внешней среде средствами биологической природы (с помощью микроорганизмов-антагонистов) имеет строго специфическое назначение. Они эффективны в основном для целей обезвреживания сточных вод на полях орошения и фильтрации, мусора и отбросов. В условиях стационаров к биологическим средствам дезинфекции может быть отнесена обработка бактериофагами объектов внешней среды для профилактики внутрибольничных инфекций.
     Химический методы. 
     Химический метод подразумевает уничтожение микроорганизмов путем применения различных химических средств, обладающих бактерицидным, вирулецидным, фунгицидным и спороцидным эффектами. Данный метод наиболее часто применяется в практике, так как химическими средствами можно обработать практически любую веешь или поверхность без нанесения ей механического вреда. 
     Основные свойства, которыми должны обладать дезинфицирующие средства:
- высокая бактерицидность;
- безвредность для людей;
- неспособность вызывать повреждение обрабатываемых предметов;
- растворимость в воде;
- стойкость при хранении;
- простота применения;
- сохранение бактерицидного действия в присутствии органических веществ;
- дешевизна производства.
     Химические вещества, применяемые для дезинфекции, относятся к следующим группам: 1) хлор и хлорсодержащие соединения; 2) йод, бром и их соединения; 3) перекисные соединения; 4) ПАВ; 5) альдегиды; 6) кислоты, надкислоты и некоторые их соли; 7) спирты; 8) фенолы, крезолы и их производные и др.Эти вещества имеют разную степень активности, неодинаковые спектры антимикробного действия, токсичность и влияние на обрабатываемые объекты и т. д. и, как следствие, широкую сферу применения ( см. таблица 1).
     Таблица 1
     Классификация дезинфицирующих веществ и антисептических средств, наиболее часто применяемых в медицинской практике.(3!стр 575)
Основные группы дезинфицирующих и антисептических веществ

Препараты
Галогенсодержащие соединения
Хлорсодержащие вещества: хлорная известь, хлорамин, пантоцид, аквасепт и др.
Йодсодержащие вещества: спиртовой раствор йода, цодинол, йодонат, йодовидон, р-р Люголя
Кислотосодержащие соединения (окислители)
Пероксид водорода, калия перманганат и др.
Поверхностно-активные вещества (детергенты)
Хлоргексидинабиглютинат, церигель, дегмицид, роккал, мыло зеленое и др.
Соединения тяжелых металлов
Препараты ртути:рткти окись желтая, ртути дихлорид (сулема) и др.
Препараты серебра: серебра нитрат (ляпис), протаргол, колларгол
Препараты цинка: сульфат цинка, цинка окись
Препараты свинца: свинца ацетат, свинца окись
Спирты
Спирт этиловый
Альдегиды
Формальдегид, циминаль и др.
Фенолы
Фенол чистый (карболовая кислота), лизол, деготь березовый, ихтиол и др.
Кислоты и щелочи
Кислоты: борная, салициловая, бензойная и др.
Щелочи: р-р аммиака, натрия гидрокарбонат и др.
Красители
Бриллиантовый зеленый, метиленовый синий, этакридиналактат( равнол)
Прочие антисептические препараты природного происхождения
Усиновая кислота, хлорофиллипт, сангвиритрин, бализ, лизоцим и др.
     
Химический метод дезинфекции сводится к применению различных химических средств, чаще в виде водных растворов, реже в виде твердых или сыпучих веществ, газа, аэрозоля. Химические средства наиболее доступны и широко применяются в практике для дезинфекции бытовых и животноводческих помещений, почвы, пастбищ, оборудования.( http://www.medn.ru/statyi/Dezinfekciya.html)
     Традиционными средствами дезинфекции являются хлорактивные препараты органической (тозилхлорамид натрия, хлорпроизводные циануровой кислоты и гидантоина) и неорганической (гипохлориты) природы. Многие хлорактивные препараты наряду с достоинствами имеют и ряд недостатков (недостаточная растворимость, низкая стабильность, резкий запах, способность раздражать слизистые оболочки глаз и верхних дыхательных путей, вызывать коррозию металлических поверхностей, разрушать и обесцвечивать ткани). Из неорганических соединений хлора крайне низкой стабильностью отличается гипохлорит натрия (NaOCl). Повысить стабильность его растворов удается добавлением силиката натрия и сульфонола, силиката натрия и уксусной кислоты или ее солей, цитраля и других веществ. 
     Высокой антимикробной активностью и широким спектром антимикробного действия отличаются препараты из группы надкислот. На основе надуксусной кислоты известны вофастерил и перстерил. Эти препараты рекомендованы для дезинфекции изделий медицинского назначения из стекла, металла, текстиля, резины, гигиенической и хирургической обработки рук.
     В последнее 10-летие широкое распространение получили дезинфицирующие средства из группы ПАВ. По способности ионизироваться в водных растворах их разделяют на катионные, анионные, амфолитные и неионогенные ПАВ. В качестве самостоятельных дезинфектантов используют только катионные и амфолитные ПАВ (например, амфолан). Амфолитные ПАВ имеют ряд преимуществ перед катионными — они малотоксичны, действуют на бактерии, грибы и некоторые вирусы, не утрачивают активности в присутствии жира и белка, не коррозируют металлы. ПАВ всех других групп применяют как полезные добавки в составе композиционных дезинфицирующих средств.
     Из группы альдегидов в практике дезинфекции используются два вещества (формальдегид (ФА) и глутаровый альдегид (ГА). Для альдегидов характерны бактерицидное, вирулицидное, фунгицидное и спороцидное действие, позволяющее отнести их к дезинфектантам высокого уровня.
     В качестве дезинфицирующих средств (и антисептиков) находят применение спирты. Их используют как самостоятельно, так и в качестве растворителей, усиливающих активность других дезинфицирующих средств. Спирты обладают бактерицидным и вирулицидным свойствами. Для дезинфекции наиболее широко применяют этиловый и изопропиловый спирты в концентрации 60–90% (по объему).
     
     1.2.	Механизмы действия дезинфицирующих средств
     Эффективность действия многих дезинфицирующих веществ зависит от многих факторов. Этозависимость биологических свойств микроорганизма, от количества микробных особей, степени обсемененности объекта микроорганизмами, от характера и рН среды, в которой находятся микроорганизмы, от температуры среды, от концентрации и химической характеристики дезинфицирующего средства, от продолжительности его воздействия на объект, от особенностей обеззараживаемого объекта, а также от метода и способа его обработки.
     Дезинфицирующие препараты, используемые с целью дезинфекции, могут оказывать цидное или статическое действие на микробные клетки.При цидном действии дезинфицирующего вещества в микробной клетке происходят необратимые процессы, влекущие за собой ее гибель.При статическом действии дезинфицирующего вещества происходит только угнетение жизнеспособности микробной клетки.
     Исходя из различной чувствительности микробов к дезинфицирующим средствам, при применении различных концентраций дизенфектантов может происходить: уничтожение аспорогенных форм бактерий, в том числе микобактерий, стафилококков, грибов, вирусов, а также возбудителей опасных инфекций (чумы, холеры, сапа, мелиоидоза), уничтожние цист простейших, уменьшение контаминации условно-патогенными микробами объектов внешней среды.
     Цидное или статическое действие дезинфицирующих средств зависят от концентрации и свойств самого дезинфектанта, его физического состояния и антимикробной активности, от рН среды, от концентрации микробных особей, от адсорбции этого вещества на оболочке клетки и скорости проникновения его внутрь, от строения клетки и проницаемости ее оболочки, от влияния дезинфектанта на процессы метаболизма в клетке. Процесс гибели микробных клеток происходит медленно. На этот процесс влияние оказывают также температура, вязкость и густота раствора дезинфицирующего вещества, наличие органических веществ в окружающей среде, вид возбудителя и его резистентность к факторам окружающей среды, свойства обеззараживаемого объекта, длительность контакта микробных клеток с дезинфектантом и их чувствительность к нему. Так стафилококки и стрептококки более устойчивы к дезинфицирующим веществам, чем кишечная палочка. Среди микробов кишечной группы наиболее чувствителен холерный вибрион, а возбудители туберкулеза и проказы более устойчивы, чем стафилококки. Наиболее стойкими являются споры бацилл и клостридий (возбудители сибирской язвы, столбняка, ботулизма и др.).
     Механизм действия дезинфицирующих средств проявляется в различных поражениях микробных клеток. Многие дезинфицирующие вещества, воздействуя на коллоидные суспензии, из которых состоит протоплазма, обуславливают денатурацию белка. Существует несколько классов соединений, представители которых в относительно низких концентрациях способны проникать в клетки и подавлять или полностью блокировать действие одной или нескольких функциональных групп того или иного фермента. В зависимости от типа клетки и природы воздействующего вещества, этот препарат либо способствует быстрой гибели клетки, либо действует статистически.
     Механизм действия дезинфектантов варьирует в зависимости от принадлежности к той или иной группе химических соединений. Так, если эффективность хлорсодержащих соединений определяется интенсивностью реакций окисления белков и других аналогичных компонентов клетки, то влияние кислот и щелочей объясняют действием водородных и гидроксильных ионов, солей тяжелых металлов – преципитацией белков клетки. Действие большей части бактерицидных веществ в конечном итоге сопровождается образованием нерастворимых комплексов. ( 11! Стр 8)
     
     1.2. Физико-химические свойства поверхностно-активных веществ
     1.2.2. Классификация ПАВ
     Все поверхностно-активные вещества делится на четыре класса: анионоактивные, катионоактивные, неионогенные и амфолитные. 
Анионоактивные ПАВ – это соединения, которые в водных растворах диссоциируют с образованием анионов (отрицательно заряженных ионов), обусловливающих поверхностную активность. На долю анионоактивных из всех производимых ПАВ приходится более 70%. 
     Катионоактивные ПАВ– это соединения, которые в водном растворе диссоциируют с образованием катионов, определяющих поверхностную активность. Объемы производства и потребления катионоактивных ПАВ значительно меньше анионоактивных, однако выпуск их увеличивается, так как они обладают ценными свойствами - бактерицидностью. 
     Неионогенные ПАВ – это соединения, которые растворяются в воде, не ионизируясь. Растворимость неионогенных ПАВ в воде обусловливается наличием в них функциональных групп. Как правило, они образуют гидраты в водном растворе вследствие возникновения водородных связей между молекулами воды и атомами кислорода полиэтиленгликолевой части молекулы ПАВ.
     По объему производства и потребления неионогенных ПАВ стоят на втором месте после анионоактивных; биоразлагаемость их достигает 100%. Они хорошо стабилизируют пены и оказывают благоприятное действие на ткани, меха и кожу. Поскольку неиогенные ПАВ в большинстве случаев бывают жидкими или пастообразными, они большей частью используются в жидких или пастообразных моющих средствах; в порошкообразные вводятся в виде добавок [2- 6% (масс.)]. 
     Амфолитные ПАВ – это соединения, которые в водных растворах ионизируются и ведут себя в зависимости от условий (главным образом от рН среды), т. е. в кислом растворе проявляют свойства катионо-активных, а в щелочном растворе - анионоактивных поверхностно-активных веществ.
     
1.2.3. Механизм действия моющих ПАВ
     Особенность строения молекулы ПАВ, состоящей из гидрофобной и гидрофильной частей, обусловливает его специфические свойства, которые эффективно используются в процессе отмывания загрязнений.

	Поверхностно-активные вещества – это, как правило, органические соединения, молекулы которых содержат атомные группы, сильно различающиеся по силе взаимодействия с растворителем, например с водой. Так, в молекулах ПАВ имеются гидрофильные и гидрофобные группы. Слабое взаимодействие с водой гидрофобных групп вызывает стремление молекулы перейти из водной среды в углеводородную, гидрофильные группы, наоборот, удерживают молекулу в водной среде. 
     Адсорбция гидрофильных групп молекул ПАВ на поверхности раздела фаз (на поверхности загрязнения) вызывает понижение поверхностного натяжения, что и обеспечивает перевод загрязнений в раствор, т. е. отмывку загрязнений с ткани или другой поверхности. На этом, собственно, и основано применение ПАВ в моющих средствах. 
     Различные ПАВ неодинаково понижают поверхностное натяжение растворов. Так, в случае линейных алкилбензолсульфонатов поверхностное натяжение уменьшается при увеличении концентрации ПАВ. В случае алкилсульфатов поверхностное натяжение уменьшается по мере увеличения концентрации их в растворе, но до определенного предела, за которым оно остается постоянным. 
     Катионактивные ПАВ, содержащие не менее десяти углеродных атомов в алкильной цепи, проявляют специфические поверхностно-активные свойства. В водных и неводных растворах четвертичные соли аммония, содержащие хотя бы один длинноцепочный радикал (R > С10), снижают поверхностное натяжение, ускоряют смачивание, способствуют пенообразованию, эмульгированию и диспергированию. Исследованиями ряда авторов (Воглер с соавт., Молин, Грис, Лимнов, Эпштейн, Нехорошева и др.) показано, что по мере увеличения числа углеродных атомов активность катионных ПАВ быстро возрастает и доходит до максимума, который в зависимости от строения молекулы соответствует соединениям, содержащим углеводородный радикал с 12, 14, 16, 18 атомами углерода. Однако, по мнению многих авторов, активность катионных ПАВ определяется не только длиной алкильного радикала, но и структурой молекулы в целом. Можно предположить, что более правильной является точка зрения Хенча и Глейва, которых считают, что для объяснения закономерностей корреляции между биологической активностью и химической структурой даже в пределах одного гомологического ряда необходимо учитывать три фактора: гидрофобный, электронный и стерический. (11! Стр. 9 http://velt-retail.narod.ru/faq.htm )
     Амфолитные ПАВ обладают хорошей поверхностной активностью; поверхностное натяжение их растворов минимально при рН, соответствующем их изоэлектрическим точкам. Введение электролитов в моющий раствор и увеличение температуры значительно понижают поверхностное натяжение.
     Анализ литературы позволил сформулировать основные закономерности действия ПАВ на клетки грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов, приводящие к их гибели. Для обоих вариантов характерно разрушение барьера проницаемости цитоплазматической мембраны, разрушение ее структуры при концентрациях препарата, близких к суббактерицидным, и деструктивные изменения в высокомолекулярных компонентах клеток при бактерицидном действии веществ.

     1.3. Хлорсодержащие дезинфектанты
     К наиболее распространённым хлорсодержащим дезинфицирующим средствам относятся неорганические вещества – хлор, гипохлориты, диоксид хлора, и органические вещества – хлорамины, хлорпроизводные циануровой кислоты и гидантоина. Содержащие хлор дезинфицирующие вещества обладают широким спектром антимикробного действия. Эффективность указанных препаратов оценивается по массовой доле активного хлора (Cl+1). Все вышеуказанные хлорсодержащие вещества в растворах взаимодействуют с водой; при этом образуется хлорноватистая кислота:
1. молекулярный хлор в воде диспропорционирует, процесс описывается уравнением: Cl2 + H2O ? HCl + HClO; 
2. гипохлориты в водных растворах гидролизуются.
     Гидролиз гипохлорита натрия описывается уравнением: NaClO + H2O ? NaOH + HOCl; 
3. Хлорамины в воде так же гидролизуются;
     Гидролиз хлорамина Б (натриевой соли бензохлорсульфамидаC6H5SO2NClNa) описывается уравнением:C6H5SO2NClNa + H2O ? C6H5SO2NHNa + HOCl. 
     В процессе дальнейших химических реакций происходит образование сильных окислителей – кислорода и хлора, которые и обусловливают дезинфицирующие свойства. Образовавшаяся хлорноватистая кислота нестойкая, разлагается по реакции 2HOCl ? 2HCl + O2. Далее соляная кислота вступает в реакцию с хлорноватистой кислотой: 2HOCl + 2HCl ? Cl2 + H2O. Механизм действия хлорсодержащих соединений заключается в окисляющем действии кислорода и хлора. Вследствие небольшого размера молекул хлор и кислород попадают в бактериальную клетку через поры клеточной мембраны путём диффузии .(Вашков ВИ. Антимикробные средства и методы дезинфекции. Медицина, М., 1977)
     Хлорноватистая кислота, вследствие выделения молекулярного хлора, может действовать не только как окислитель, но и как непосредственно хлорирующее вещество. В микробной клетке на- ряду с процессами окисления может протекать хлорирование амино- и иминогрупп структурных компонентов протоплазмы: R-CO-NH-R + Cl2 ? R-CO-NCl-R + HCl. Следует также отметить, что в результате гидролиза гипохлоритов раствор имеет щелочную реакцию, из-за чего происходит частичное омыление жиров, щелочной гидролиз пептидов, образуются растворимые продукты, легко удаляемые с поверхности оборудования: глицерин и соли высших жирных кислот, соли аминокислот. В литературе указывается на высокую окислительную активность гипохлоритов при pH, близких к 7, когда в растворе имеются соизмеримые концентрации гипохлорит-ионовOCl- и молекул HOCl. Это связано с возможностью возникновения неустойчивых молекул изохлорноватистой кислоты, структура которой позволяет предполагать наличие у неё повышенной тенденции к отщеплению активного атома кислорода [00]. В других источниках указано, что антимикробная активность хлора и его соединений повышается при снижении pH .00(Вашков ВИ. Антимикробные средства и методы дезинфекции. Медицина, М., 1977)Это может быть объяснено тем, что в солянокислой среде активизируется выделение молекулярного хлора. Таким образом, хлорсодержащие ДС наиболее активны в слабокислых и нейтральных растворах. Для повышения антимикробной активности хлорсодержащих препаратов применяют подкисление или аммонизацию их растворов. Для приготовления активированных растворов ДС в них добавляют соли аммония (нитрат, сульфат, хлорид) в соотношении к активному хлору 1:1, или аммиак в соотношении 1:8. Преимущество активированных растворов заключается в сокращении расхода хлорактивных препаратов и экспозиции. Активированные растворы обесцвечивают ткани, при работе с ними нужно обязательнопользоваться респиратором. Гипохлориты постепенно разлагаются, поэтому дезинфицирующие вещества имеют короткие сроки хранения. Гипохлорит натрия, выпускаемый отечественной промышленностью, в котором содержится 14-17% активного хлора, отличается крайне низкой стабильностью. Имеются сообщения о повышении стабильности растворов гипохлорита натрия за счёт снижения в них при- меси хлористого натрия, а также путём добавления к растворам гипохлорита натрия силиката натрия и сульфинола, силиката натрия и уксусной кислоты или её солей, цитраля и др. 1(. AC 1181990, 1985. Способ стабилизации раствора гипохлорита щелочного или щелочноземельного металла. Колесников ИВ, Михайлов ЛА, Ламбрев ВГ. БИ 1985; (36): 91) 2(АС 1407901, 1988. Способ стабилизации раствора гипохлорита щелочного или щелочноземельного металла. Колесников ИВ, Орлов ВВ, Михайлов ЛА. БИ 1988; (25): 108)Увеличение температуры способствует возрастанию антимикробной активности хлорсодержащих препаратов, однако при этом скорость разложения нестабильных гипохлоритов увеличивается. Производители оборудования (например, Fresenius), рекомендуют производить дезинфекцию при 37°C. Самыми распространёнными хлорсодержащими дезинфицирующим средством являются гипохлориты кальция, натрия и лития. Растворы гипохлорита натрия используются для дезинфекции гемодиализного оборудования Moranon, Sporotal, Tiutol. (правила эксплуатациимед.оборудования)

     1.3.1.Физико-химические свойства и механизм действия гипохлорита натрия
     Гипохлорит натрия (ГПХН) – неустойчивое соединение, легко разлагающееся с выделением кислорода. Самопроизвольное разложение медленно происходит даже при комнатной температуре: например, за 40 суток наиболее устойчивая форма – пентагидрат ГПХН (NaOCl·5H2O) теряет около 30 % активного хлора:
2NaOCl ? 2NaCl + O2
     При нагревании ГПХН параллельно с его разложением происходит реакция диспропорционирования:
3NaOCl ? NaClО3 + 2NaCl  
     Гипохлорит натрия образует в воде хлорноватистую кислоту и гипохлорит ион в соотношениях, определяемых рН раствора, а именно соотношение между ионом гипохлорита и  хлорноватистой кислотой определяется протеканием реакций гидролиза гипохлорита натрия и диссоциации хлорноватистой кислоты  (см. Рис. Изменение форм активного хлора в растворе гипохлорита натрия в зависимости от рН раствора). 

Рис. Изменение форм активного хлора в растворе гипохлорита натрия в зависимости от рН раствора.
     Растворяясь в воде, ГПХН диссоциирует на катионы натрия и анионы хлорноватистой кислоты:
  NaOCl ?  Na+ + OCl? 
     Так как хлорноватистая кислота (HOCl) является очень слабой, гипохлорит-ион в водной среде подвергается гидролизу:
OCl? + Н2О ? НОСl + ОН? 
     Водные растворы ГПХН неустойчивы и со временем разлагаются даже при обычной температуре, и что наиболее устойчивы растворы с сильнощелочной средой (pH  > 11).
     Наличие хлорноватистой кислоты в водных растворах гипохлорита натрия объясняет его сильные дезинфицирующие и отбеливающие свойства. 
     Гипохлорит натрия (NaOCl) на сегодняшний момент одно из лучших известных средств, проявляющих благодаря гипохлорит-аниону сильную антибактериальную активность. Это средство убивает микроорганизмы очень быстро и при достаточно низких концентрациях, поскольку разложение гипохлорита сопровождается образованием ряда активных частиц (радикалов) и, в частности, синглетного кислорода, обладающего высоким биоцидным действием.(статья  «Хлорирование питьевой воды»). Образующиеся при распаде ГПХН частицы (радикалы) способствуют в уничтожении микроорганизмов (способных к окислению), разрушая окружающую их биопленку, что приводит к гибели микроорганизмов. 
     Исследованиями установлено, описанный выше процесс аналогичен тому, что происходит естественным образом во всех высших организмах. Так, некоторые клетки человека (нейтрофилы, гепатоциты и др.) синтезируют хлорноватистую кислоту и сопутствующие ей высокоактивные радикалы для борьбы с микроорганизмами и чужеродными субстанциями.
     Наивысшая бактерицидная активность гипохлорита натрия проявляется в нейтральной среде, когда концентрацииHClO и гипохлорит-анионов ClO? в процессе гидролиза и диссоциации ГПХН приблизительно равны.
     Что касается бактерицидных свойств ГПХН, то можно привести несколько примеров:
     грибки, вызывающие кандидоз, Candidaalbicans, погибают invitro в течение 30 секунд при действии 5,0 ± 0,5%-го раствора NaOCl (при концентрации действующего вещества ниже 0,05 % они проявляют устойчивость только спустя 24 часа после воздействия на них ГПХН);более резистентные к действию гипохлорита натрия энтерококки. Так, например, патогенный Enterococcusfaecalis погибает через 30 секунд после обработки 5,25% -ым раствором или через 30 минут после обработки 0,5%-ым раствором;грамотрицательные анаэробные бактерии, такие как Porphyromonasgingivalis, Porphyromonasendodontalis иPrevotellaintermedia, погибают в течение 15 секунд после обработки 5,0 ± 0,5%-м раствором NaOCl.(http://wwtec.ru/index.php?id=410)
     
     1.4.Механизм действия кислот
     Бактерицидность кислот зависит от их свойств отнимать воду у тканей, осаждать белки и взаимодействовать со щелочами.Сила воздействия кислотна микроорганизмы,а следовательно,те изменения в живой ткани, которые происходят в результате этого воздействия, зависят от концентрации водных растворов кислот.
     Наиболее сильное бактерицидное действие оказывают следующие кислоты: фтористоводородная, азотная п трихлоруксусная молярные растворы которых обезвреживают споры микробов сибирской язвы за 2 часа. Кислота средней силы – соляная, обезвреживает споры после 8-часового воздействия. 
     Серная и фосфорная кислоты по бактерицидности относятся к слабо действующие кислотам, не обезвреживающим спор в молярных растворах и после 30 часового действия. Уксусная, муравьиная и цианисто - водородная кислоты обладают еще меньшими бактерицидными  свойствами.
Температура оказывает весьма большое влияние на действие кислот: при повышении температуры на 10°С бактерицидность усиливается вдвое и даже втрое.
     Наличие белковых и других органических веществ в обеззараживаемой среде значительно понижает бактерицидный эффект  кислот вследствие того, что они вступают во взаимодействие с загрязнениями. Кроме того, кислоты растворяют многие металлы, ткани, краски, поэтому применение кислот для дезинфекции  ограничено. (почка - http://www.nephron.ru/files/nuk.pdf)
     Некоторые кислоты проявляют избирательное действие па микроорганизмы. Так, соляная кислота превосходит все другие  по действию на споры и кокки, а серная, будучи менее активной в отношении спор микробов сибирской язвы, довольно активна, в отношении стафилококков; фтористоводородная кислота оказывает сильное спорицидное действие на возбудителя сибирской язвы.
     Из группы кислот в дезинфекционной практике применяют соляную, серную, молочную, уксусную, муравьиную, щавелевую.
     Бактерицидные свойства кислот зависят как от степени диссоциации, то есть от концентрации катионов водорода, так и от природы кислотного аниона. Оптимальные концентрации водородных ионов для жизнедеятельности бактерий обычно лежат в широком диапазоне (pH=4-9). Большинство бактерий не могут переносить среды, pH которых ниже 4-5. Значение pH окружающей среды может существенно влиять не только на рост, но и на другие метаболические процессы, а также на морфологию организмов. Цито- плазматическая мембрана микроорганизмов сравнительно мало проницаема для водородных и гидроксильных ионов, так что их концентрация в цитоплазме остаётся практически постоянной, несмотря на то, что значения pH окружающей среды колеблются в широких пределах. (Лекция «Дезинфекция» Крупальник В.Л., Попов Н.И., Васенко С.В. «Московская государственная академия ветеринарноймедицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»)
     Влияние pH среды на жизнедеятельность микроорганизмов может быть обусловлено взаимодействием ионов водорода и гидроксида с ферментами в цитоплазматической мембране и клеточной стенке, а также связыванием катионов металлов, входящих в состав ферментов, анионами кислот в комплексные соединения, что приводит к необратимому ингибированию ферментов(. Роуз Э. Химическая микробиология.Мир, М., 1971)
Особенности дезинфекции и стерилизации в амбулаторной стоматологии, Мороз Б.Т., Мироненко О.В. 2008г.
Л.В.Дульнева, В.А.Лазеба, А.В.Смирнов, Е.Д.Суглобова, 2005 УДК 616.61-008.64-036.12-085.38:614.48 Л.В.Дульнева, В.А.Лазеба, А.В.Смирнов, Е.Д.Суглобова СОВРЕМЕННАЯ ПРАКТИКА ДЕЗИНФЕКЦИИ АППАРАТА «ИСКУССТВЕННАЯ ПОЧКА» Кафедра общей и биоорганической химии, Научно-исследовательский институт нефрологии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. И.П. Павлова, НПО «Нефрон», Санкт-Петербург, Россия. ( http://www.nephron.ru/files/nuk.pdf )
2. Объект и методы исследования
2.1. Объекты исследования
     Объектом исследования данной работы являютсядезинфицирующие средства:«DOSIA», «SANITA», «COMET», «SARMA», «Туалетный утенок».

2.2. Схема эксперимента
     Исследование проводилось по следующей схеме:
1. Выбор дезинфицирующих средств;
2. Сравнение антибактериального действия в рекомендуемых концентрациях;
3. Установить минимальную подавляющую концентрацию методом серийных разведений в жидких средах;
4. Подтвердить минимально подавляющую концентрацию, сделав посев на плотную питательную среду – мясо-пептонныйагар (МПА).
     Поскольку минимальная подавляющая концентрация была установлена не у всех средств, было введено понятие минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

2.2.1. Выбор бытовых дезинфицирующих средств
	При выборе дезинфицирующих средств мы исходили из таких критериев, как:
- высокая бактерицидность (по заверению производителя);
- безвредность для людей;
- неспособность вызывать повреждение обрабатываемых предметов;
- простота применения;
- доступная цена.
	В результате были отобраны 5средств различных торговых марок с разными составами, которые соответствуют наши.......................