Материалы и методы исследования

     ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
     Морфофункциональному и иммуногистохимическому исследованию обортивного материала посвящено небольшое число работ, выводы которых весьма противоречивы.
     Оценка гистологических и иммуногистохимических изменений соскоба слизистой оболочки матки и последа  у женщин,по мнению авторов строится на субъективных критериях[12,55,68].
     В проведении данного научного исследования нами использованы гистологические, гистохимические, морфометрические, иммуногистохимические  методы исследования.
2.1.Морфологическое исследование
     Нами за период 2012-2016 годы было  проведено ретроспективное морфологическое исследование биопсийного материала, взятого у женщин, находшихся на лечении в отделении патологии беременных и  в женской консультациях городе Туркестан и Кентау.
     Всего проанализировано 250 случаев биопсий соскоба полости матки с диагнозом недоразвившийся беременность, которые были разделены на 6 групп по эмбриогистологическому сроку:
     I - группа – недоразвившийся эмбрион при сроке 5-6 недель (n=50).
     II - группа – недоразвившийся эмбрион при сроке 7-8 недель (n=50).
     III - группа – недоразвившийся эмбрион при сроке 9-10 недель (n=50). 
     IV - группа – недоразвившийся эмбрион при сроке 12 недель (n=40).
     1-группа сравнения – немедикаментозное  прерывание  беременности  по желанию женщин в сроке 5-6 недель (n=30)
     2-группа сравнения – немедикаментозное  прерывание  беременности  по желанию женщин в сроке 8-10 недель (n=30)
     При изучении клинических данных обращали внимание на возраст, стаж работы,  клинические симптомы, срок беременность, по счету какой беременность, а также учитывали первичность и повторность аборта.
     Материалом для исследования послужил y недоразвившийся материал при замерщей беременности на сроке от 5 до 12  недель, поступивший в отдел патоморфологии  КДЦ МКТУ  им. А. Ясави  и Областной патологоанатомической бюро. Проводили морфологическое (светооптическое и иммуногистохимическое) исследование абортивных материалов  в  сроке  от  5 до 12 недель эмбрионального периода у женщин в возрасте от 20 до 40 лет, с неразвивающейся эмбриона, полученной путем соскоба слизистой оболочки матки для последующего гистологического исследования.
     Критериями исключения из исследования явились женщины: старше 40 года, с диагностированным в анамнезе эндокринной патологии, ссодистой болезни, опухоли, неразвивающаяся плода  с гистологическими признаками поражения эндометрия при беременности, а так же самопроизвольный выкидыш.
     Комплексное исследование материала осуществляли на различных уровнях структурной организации – органном, тканевом, клеточном (табл. 1).
Таблица 1
Дизайн исследования материала
	
Уровень структурной организации
Материал
Методы исследования
Органный
Соскобы, последы
1. Макроскопическое изучение.
2. Органометрия: масса, объем плацент.
Тканевой
Эндометрий, ворсинчатый хорион, базальная децидуальная оболочка плацент
1.Гистологический метод: окраска гематоксилином и эозином.
2.Морфометрия: гистостереометрия,  расчет индекса васкуляризации ворсин.
Клеточный
Эндометрий, ворсинчатый хорион, базальная децидуальная оболочка
Иммуногистохимическое: VEGF- KISS1

2.2.Методы исследований
     Макроскопическое изучение препаратов абортивного материала сопровождалось фотосъемкой. 
     Для проведения исследования соскоба и последа вырезали кусочки и фиксировали на  10( растворе нейтрального формалина иобезвоживали на спиртовке возрастающей концентрации затем заливали в парафин. Микротоме из  парафиннового блока приготовляли  срезы толщиной 5-7 мкм и окрашивали гематоксилином и эозином, изучали под световом микроскопе. Микроскопическом  исследовании по состоянию ворсин хориона, децидуальных клеток и трофобласта  оценивалась состоянии  беременность.
     Для световой микроскопии использовался микроскоп «LEICA DM 500 B» (Германия) с фотокамерой LEICAICC 50, при помощи которой делали снимки гистологических и полутонких срезов. На полученных снимках давали гистологическую характеристику соскоба и последа, осуществляли морфометрические исследования  соскоба с использованием прикладной компьютерной программы «ВидеоТест Мастер Морфология». Морфометрия соскобов проводили по методике, разработанной Д.М. Морозовым[64] .
     Определение массы, размеров, площади и объема различных структур тканей представляет важную задачу при изучении морфо-функциональных и патологических изменений в органах. 
     По мнению авторов [4,12,55,68,72], системный количественный анализ структурной перестройки тканевых элементов, их композиций и связей дает весьма убедительный материал для доказательств характера морфологических изменений и связанных с ними функциональных сдвигов в тканях и системах, выявляет их сущность.
     При световой микроскопии оценивалась полноценность децидуальной трансформации эндометрия и  желёз в соответствии со сроком гестации, а так же  определели  удельного объема 5 структурных компонентов плаценты, характеризующих состояние материнско-плодового кровообращения: сосудов и стромы ворсин, межворсинчатого пространства, материнского фибриноида, инфарктов-петрификатов и  оценивали состояние клеиочных структурплацента, выявляли  морфологические отличии и так же степень ее выраженности воспалительных реакций [55,72].
     Иммуногистохимические исследования проводили в отделении онкогистологии  на базе  Областного онкологического центра г.Шымкента.
     Иммуногистохимии использовали стандартный схеме при  высокотемпературной обработкой ткани  в 0,01 М цитратном буфере рН 7.6
     Методика для визуализации иммуногистохимической реакции выполнялась по следующей схеме [70].
     В  гистологических структурах – ворсин хориона децидуальной ткани,оценивалось оптической плотность и площадь экспрессии. Определение размеров, площади и объема различных структур тканей представляет важную задачу при изучении морфо-функциональных и патологических изменений в ворсинах хориона  и эндометриях.

2.3.Методы статистической обработки результатов
     Результаты обработки материала с оценкой поправочных коэффициентов подвергали статистической обработке и полученные данные использовали для всей совокупности препаратов, которые были приготовлены в стандартных условиях.
     Для определения истинных размеров микрообъектов (к) размеры, полученные при измерениях, умножали на поправку, характеризующую его усадку.
     При фиксации тканей коэффициента можно было найти по их объему до (V) и после (Vf) фиксации по формуле : f3 = V/Vf.
     Полученные цифровые данные подвергнуты статистической обработке с вычислением среднеарифметического значение М, стандартных ошибок m, показателей достоверности различий сравнительных величин t и Р. (185, 186). Величину Р ниже 0,05 рассматривали как показатель достоверности различий. Для статистической обработки использовали персональный компьютер IBM с использованием статистических программ "Statgraf".
     Экспрессии белка KISS1 и эндотелии артерии VEGF оценивали путем использованием  статистического анализа «Морфология 5.2» (ВидеоТест, Россия).






























ГЛАВА3.РЕЗУЛЬТАТЫСОБСТВЕННЫХ ИССЕДОВАНИЙ
3.1.Результаты исследуемых групп женщин  по возрасту
     Исследуемые группы женщин имели возрастные ограничения от 2О до 40 лет. В таблице №2 представлено распределение исследуемых групп женщин  по возрасту.                                                                                                          
Таблица 2. Распределениеженщинв исследуемыхгруппахпо возрастномукритерию
Группы
20-25лет
 26-30лет
 31-35лет
 36-40лет

n
%
n
%
n
%
n

%
I– группа-5-6 недель
(n = 50)
3
6,0
8
16
7
14
7
14
II – групп- 7-8недель
(n = 50)
6
12
9
18
6
12
4
8
III – группа- 9-10 недель
(n =50)
4
8
12
24
4
8
10
20
IV– группа- 12 недель
(n =40)
4
10
3
7,5
4
10
0

0
1 –группа сравнения
5-6недель(n = 30)
5
16,6
3
10
3
10
0

0
2 – группа сравнения
7-8недель(n =30)
2
6,7
3
10
5
16,6
0

0
Из данных в таблице 2, на сроке 5-6 недель невынашивания  беременность частовстречаласьуженщинввозрасте26-30лет(16,0%),атакжеуженщин36-40лет(14,0%),аналогичнаякартинанаблюдаласьу женщин:31-35лет–14,0%.Приэтомнасроке7-8недельнаибольшаячастотаневынашиваниябеременноститакжепреобладалауженщинввозрасте26-30лет(18,0%),затемследовалвозраст31-35лет(12,0%),аженщиныввозрасте36-40летзанималилишьтретьюпозицию (8,0%).Насрокегестации12недельневынашиваниябеременностьбылапредставленау женщин возрасте 26-30 лет (7,5%),а остальных группах отмечались равномерно.
     В первой группе на сроке 5-6 недель частота перво- и повторнобеременных женщин была проанализировано одинаковой. Во второй группе (7-8 недель) количество первобеременных встречалось достоверно чаще по сравнению с 
В диаграмме №1 представлена характеристика обследованных женщин с неразвивающейся беременностью по паритет.


     
     Втаблице3представленахарактеристикаобследованныхженщинснеразвивающейсябеременностьюпопаритету.
Таблица 3. Распределениеобследованныхженщинпобеременностью
Исслед.Группы
Первобеременные
Повторнобеременные

n
%
n
%
I– группа-5-6недель(n =50)
25
50,0
25
50,0
II – групп- 7-8недель
(n = 50)
29
58,0**
21
42,0
III – группа- 9-10 недель
(n =50)
27
54,0
23
46,0
IV– группа- 12недель
(n =40)
19
47,5
21
52,5
 **p<0,01присравнениисповторнобеременнымиженщинами.

повторнобеременными женщинами (p<0,01). Число первобеременных в третьи группе (9-10 недель) было больше половины, тогда как в четвертой (12 недель) напротив, преобладали повторнобеременные женщины. В сравнения исследуемых группах, при распределение между повторно- и первобеременных женщин было равномерным.
     Следует отметить,что среди экстрагенитальных заболеваний в обследованных группах чаще всего диагностировался хронический пиелонефрита, хронический сальпингита, лейомиома матки, хронического цервицита,холецистита и энтероколита, миопия легкой степени. Миопия различными  степенями отмечалось у женщин  второй группы в 22, 2% (10) случаев.
	Гинекологическая патология была выявлена у всех женщин, причем наиболее часто у женщин наблюдалась заболевание шейки матки и яичников, урогенитальная инфекция. Контрольные группы были выбраны здоровых женщин, в анамнезе не имеющих  патологии гинекологической и нейроэндокринной системы.                 
     Данные, представленные в таблице 4 и диаграмме 2, показали высокую частоту патологии яичников и хронического аднексита у женщин в исследуемых группах, имеющих большой удельный вес среди причин невынашивания беременности  1 триместре.

Таблица  4.Частота гинекологическойпатологии ванамнезе уженщин в исследуемыхгруппах.


Нозология
I–группа
(n = 50)

II-группа
(n = 50)

(n =50)
III – группа
(n = 50)
IV– группа
(n = 40)

n

%
n

%
n
%
n
%
Хронический
аднексит
9
18,0
8
16,0
10
20
12
30,0

Патология яичников
6
16,0
8
16,0
10
20,0
7
17,5
заболевания шейкиматки

6

12,0

7

14,0

13

26,0

4

10
Воспалительные
заболевания маткиипридатков
15
30,0
12
24,0
10
20,0
11
27,5
Урогенитальная
инфекция
16
32,0
20
40,0
14
28,0
15
37,5


Таблица 5. Место работы обследованных беременных.
№
Вид работы
Основная группа
Контрольная


I – группа - 5- 6 недель
(n = 50)
II – группа - 7-8 недель
(n = 50)
III – группа- 9-10 недель
(n = 50)
IV – группа- 12 недель
(n = 40)
группа сравнения
5-8 недель  (n = 60)


n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
1
Домохозяйки
18
36
13
26
20
40
15
37,5
26
43,3
2
Работающие
23
46
26
52
23
46
20
50
19
31,7
3
Студентки
9
18
11
22
7
14
5
12,5
15
25




3.2.Гистологическоеисследование структурдецидуального эндометрияпри невынашивания беременности

Результаты патогистологическое исследование дали оценку децидуальных изменений эндометрия: стромы, желез губчатого слоев, степень образования  извитых спиральных артерий  и инфильтрированного фибрина  стенок сосудов, зоны плацентарного ложа с оценкой степени трофобластической инвазии, изучение состояния ворсинчатого хориона, а так же верификации морфофункциональных изменений эндометрия.
Одним из критериев патогистологической сравнении наличие  единного пласта, эпителиоидного типа децидуальных клеток с четкими границами, наличием ядра с хроматином, а так же ее цитоплазмы исследуемого  материала явилось состояние полноценности децидуальной трансформации эндометрия. При неполноценной децидуальной трансформации эндометрий характеризовалось  децидуальными клетками незрелого типа, имеющим малого размера  и  форму с гиперхромным ядром, разделенной находившимися в строме.
     Следует отметить,что микроскопическое  исследование врсины хориона отметили  несходные изменения, что, это, харктерно некоторыми  особенностями невынашивания беременности. Самопроизвольное прерывание беременности  характеризовалось с элементами воспалительной реакции в 50,0% случаев,у женщин основной группы (см. рис.1).
Оценка степени отложение фибрина  стенок  извитых спиралевидных артерий в группах сравнения показала, что на сроке 5-12 недель беременности выявлялись выраженные  спиралевидных артерий с умеренной степенью фибриноидного некроза извитых спиральных артерий в 9 случаях, и лишь в 1 случае – слабая степень фибриноидного некроза спиральных артерий. При этом на сроке 7-8 недель присутствовали выраженные извитые спиральные артерий с завершенным фибриноидным некрозом во всех случаях.
Поскольку процесс децидуализации эндометрия в париетальных отделах полностью завершается к 6 неделям беременности, то наличие незавершенной трансформации, выявляемой свыше указанного срока,  следует  рассматривать как патологический процесс.



Рисунок.1.Лимфомакрофагальная очаговая инфильтрация децидуальной ткани. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение x280.



Рисунок.2.Кровоизлияние в межворсинчатом пространстве. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение x280.


Рисунок.3.Межворсинковый фибриноид. Окраска гематоксилином
и эозином. Увеличение x280.

     Оценка децидуальной  трансформации эндометрия в группах сравнения на 5- 6 (n=50) и 7-8 неделях (n=50) эмбриогистологического срока показала, что во всех случаях присутствовала полноценная децидуальная трансформация эндометрия.
     
     
     Рисунок.4.Полноценная децидуальная трансформация эндометрия с децидуоцитами эпителиоидного типа с пузырьковидным ядром.Окраска гематоксилин и эозин, х280.

Рисунок.5.Неполноценнаядецидуальнаятрансформацияэндометрия.Окраскагематоксилини эозин, х280.
     Помимополноценностигравидарныхпревращенийэндометрия,значениеимеет трансформацияжелез компактного и спонгиозногослоев.
     Кмоментуимплантациибластоцистыжелезыкомпактногослоясоответствуютсреднейстадиифазысекрециисхарактернымизвездчатымиочертаниями.Сувеличениемсрокагестациитрансформацияжелезхарактеризуетсясужениемпросветадощелевидноговсвязисдецидуальнымипревращениямиэндометрия(рисунок4,5).
     Кроме щелевидных желез в компактном слое эндометрия встречаются железы с кистовидно измененным просветом и наличием в просвете секрета, как в небольшом, так и в значительном количестве (рисунок 6,7).
     Результаты исследования показали, что полнофункциональная децидуальная трансформация эндометрия у пациенток на фоне гормональной поддержки беременности выявлялась в 60% случаев на сроке 12 недель, в 33-40% на сроке 7-10 недель, и только в 15,5% на 5-6 неделях эмбриогистологического срока. Прекращение развития беременности неизменно влечет за собой изгнание продукта зачатия из полости матки, при этом в децидуальных оболочках проявляет не только инволюционно-дистрофические изменения,но и возникают некротические процессы эндометрия и как
                                                                        
     Рисунок.6.Железыкомпактногослояэндометрия.Окраска гематоксилини эозин, х280.
     
     
     
Рисунок. 7. Эктазия желез с наличием в них секрета. Окраска гематоксилин и эозин, х280.
 следствие присоединение вторичной  экссудативной  воспалительной  реакции (рисунок 8,9).
Контрольной группе на сроках гестации 5-6 и 7-8 недель дистрофических изменений ворсинах хориона не отмечалось.На сроках 5-6 недель гестации в ворсинах хориона выявлялись эритробласты в просвете артерии, тогда как на сроке 7-8 недель в сосудах присутствовали не только ядерные, но и без ядерные формы эритроцитов в соотношении 1:1.
На сроках гестации 5-6 и 7-8 недель были обнаружены с неравномерные гидропические изменения в гипо- и аваскуляризированной строме ворсины хориона , истончением хориального синцития в 75,4-82,6% случаев (рисунок 10,11). Частота выявления гидропически измененных ворсин с истончением хориоального синцития и гиповаскуляризированной стромой  составила 55,7%, на сроке гестации 9-10 недель. 


Рисунок.8.Ретроплацентарная гематома.Окраска гематоксилин и эозин, х280.

Рисунок.9.Некротические изменения с участками кровоизлияния. Окраска гематоксилин и эозин, х280.

Рисунок.10.Стромальнососудистый изменения ворсин хориона.. Окраска гематоксилин и эозин, х280.

Рисунок.11. Гидропические изменения аваскуляризированной стромы ворсин хориона. Окраска гематоксилин и эозин, х280.
      На сроке 12 недель беременности у ворсины хориона изменений подобного рода выявлялось в 45,3%. При этом часть сосуда ворсин имела гипоплазированные и менее выраженными с гомогенизированными ядрами трофобласта. В исследуемом материале выявленные изменения ворсин позволяли предпологать наличие аутоиммунной изменение трофобласта.
      Таким образом, в суммируя проведенного патогистологического исследования было доказано, что полноценная перестройка эндометрия при невынашиваниябеременности была отмечено во всех исследуемых группах в достоверном проценте (61,2%) случаев. Суммируя этих данных, что при гестационном сроке беременности 7-8 недель  полнофункциональная децидуальная трансформация желез пористого слоя эндометрия диагностировалась достоверно чаще у пациенток без приема медикаментозных препаратов (p<0,001). Слабо выраженная децидуальная трансформация на этом же сроке, напротив, встречалась достоверно реже по сравнению с группой, где прием сохраняющих медикаментозных препаратов был (p<0,05). При этом дефективная децидуальная трансформация желез спонгиозного и компактного слоев эндометрия в исследуемом материале третьи группы встречалась в 2 раза чаще у пациенток, не получавших медикаментозную  поддержку беременности.
      При исследовании извитых спиральных артерий выявлено, что во второй группе на сроке 7-8 недель гестации полнофункционально сформированные извитых спиралевидных артерии с завершенным фибриноидным некрозом и полноценный извитый спиралевидный  артерии с недовершенным фибриноидным некрозом вне зависимости от количества сохраняющих медикаментозных препаратов выявлено с одинаковой частотой. Одновременно полноценно выработанные извитые спиральных артерии с недоконченным фибриноидным некрозом при приеме медикаментозных препаратов встречались в 2 раза чаще. На сроке 9-10 недель гестации аналогичная картина повторялось.
3.3. Иммуногистохимическое исследование с оценкой эффективности рецепторов VEGF в ворсинах хориона и строме гравидарного эндометрия
При сравнение площади экспрессии VEGF в строме децидуального эндометрия статистические отличий между основными группами не отмечалось. При сличении данных с  сроком гестации  в основных группах отмечалось уменьшение площади экспрессии  без достоверных отличий. При сравнении второй основной группы со 2 группой сравнения на сроке 7-8 недель гестации выявлялось достоверное снижение площади экспрессии (p<0,05). На рисунке 12,13 представлена отрицательная эффективность VEGF в ворсинах хориона и строме децидуального эндометрия.

Рисунок.12. Эффективность рецепторов VEGF в строме децидуального эндометрия. Иммуногистохимическая реакция, х400

Рисунок.13.Эффективность рецепторов VEGF в ворсинах хориона. Иммуногистохимическая реакция, х400.

Рисунок.14. Отрицательная эффективность VEGF в ворсинах хориона. Иммуногистохимическая реакция, х400.
     Известно, что процесс ангиогенеза и инвазия трофобласта являются прогестерон зависимыми. Процесс инвазии трофобласта в эндометрий матки регулируется не только прогестероном, но и белком регулятором трофобластической инвазии – кисспептином (KISS1). 
     Ангиогенез является гормонзависимым процессом. Когда наступает беременность при недостатке цикла лютеиновой фазы  могут быть причиной ее нарушения и явиться неполноценное кровоснабжение ворсин хориона и растущего организма плода. В конце четвертой недели беременности полноценный кровообращения в спиральных артериях эндометрия поддерживается благодаря  процессам фибриноидного некроза стенки спиральных артерий. При изучении  спиралевидные  артерий выявлено, что на сроке 7-8 недель полноценно сформированные извитые спиралевидные артерии с завершенным и неоконченным пропитывание фибрина в стенке сосуда показатели были с одинаковой частотой. При приеме медикаментозных препаратов сформированные извитые спиралевидные артерии  встречались достоверно чаще (р<0,01). При 9-10 недельной сроке гестациии  наблюдалась противоположная картина.
Плоский поверхности экспрессии VEGF исследуемых групп совпадают с работами ряда авторов, которые показали,  рецепторов VEGF наиболее интенсивна на ранних периоде беременности. С нарастанием срока беременности эти показатели постепенно снижается. Последовательно более  поздних периодах беременности одной из основных функций VEGF является обеспечение повышенной жизнеспособности эндотелиоцитов и стабилизации сосудистого русла это подтверждает отечественные ученные своих исследованиях [47,65,87].
По данным Американской  ученных [112,117,121,150] описали мутацию в гене у пациенток с гипогонадотропным гипогонадизмом. При активном изучении роли кисспептина в репродуктивной системе женщины было обнаружено, что данный пептид и его рецептор KISS1 выявляются в виллезном и экстравиллезном  клетке  трофобласте  при беременности. Одной из задач нашего работы является  определение кисспептина и его рецептора в гравидарных структурах.
3.4. Иммуногистохимическое исследование с оценкой эффективности белка и его рецептора KISS1 в ворсинах хориона и строме децидуального эндометрия
     В первой группе всроке 5-6 недель диаметр экспрессии рецептора KISS1,по сравнению на сроке 7-8 недель (p<0,01) значимо ниже в ворсинах хориона. В одной тоже время, что при сличении с 1 группой сравнения выявлялось  достоверное повышение экспрессии рецептора KISS1 (p<0,05). Выявленные параметры  были  сходны  со 2 группой сличения. А во второй группе на эмбрио сроке 7-8 недель рецепторы KISS1 в ворсинах хориона была значимо выше по сравнению с I (5-6 недель), IV (12 недель) и обеими группами сравнения (p< 0,01). На рисунке 15 показана эффективность рецептора KISS1 в строме   эндометрии  и ворсинах хориона.
     На рисунке 15 представлена площадь эффективности  рецептора KISS1 в строме децидуального эндометрия при сроке 5-6 недель была достоверно выше по сравнению со сроком 12 недель (p<0,05), и  в исследование значимых отличии не было выявлено  от других исследуемых групп.Падобной наблюдение отмечалось на сроке 7-8 недель,тоист  значимое увеличение  проявления рецептора KISS1 по сравнению с 12 неделями срока (p<0,01).
     Эффективность белка кисспептина (KISS1) в ворсинах хориона и строме децидуального эндометрия во всех исследуемых группах дано в таблице 6.

Рисунок 15. KISS1 в ворсинах хориона. Иммуногистохимическая реакция, х400



Сравнительная оценка проявлении белка KISS1в ворсинах хориона и строме гравидарного эндометрия в исследуемых группах.Таблица 6.



Группы
Экспрессиябелка KISS1 в
ворсинах хориона
Экспрессиябелка KISS1 в
строме гравидарногоэндометрия

Оптическая
плотность(усл.ед.)
Площадь
экспрессии(%)
Оптическая
плотность(усл.ед.)
Площадь
экспрессии(%)
I– группа 5-6 недель
(n =50)
0,17 ±0,01
16,04 ±1,48**
0,13 ±0,03
7,75 ±1,47**
II – группа7-8 недель
(n =50)
0,19 ±0,23*
13,83 ±1,56*
0,21 ±0,01
5,78 ±1,65*
III–группа 9-10 недель
(n =50)
0,21 ±0,05*
9,37 ± 0,89*
0,23 ±0,01
10,38±1,29**
IV– группа 12недель
(n =40)
0,13 ±0,04
5,43 ± 1,47
0,07 ±0,01*
2,53 ± 0,91
1-2 группа сравнения
5-8недель(n =30)
0, 0
0, 0
0, 0
0, 0

Как видно из данных таблицы 6,зрительная плотность белка KISS1,при сроке 12-недель гестации в ворсинах хориона была достоверно ниже по сравнению со сроками 7-8 и 9-10 недель (p<0,05). В исследовании также  неотмечалось проявлении значимых отличии при сличении со сроком 5-6 недель.  На гестационном сроке 5-6 недель беременности  отмечалось выраженное увеличение диаметра проявлении белка KISS1 в ворсинах хориона (рисунок 16). При сличении со сроком 12 недель, где диаметр экспрессии исследуемого  маркера была достоверно ниже (p<0,01) и статистически не отличалась от других групп. По нарастанием эмбриогестационного срока от 5 до 12 недели выявляется  к уменьшению  проявлении  исследуемого маркера, при сличении диаметра проявлении белка KISS1. При сличении в обеих группах наблюдалось отрицательная реакция.

Рисунок.16.Эффективность белка KISS1 в строме эндометрия. Иммуногистохимическая реакция, х400
При сроке 5-6,7-8 и 9-10 недель гестации статистический значимость сравнение оценки диаметра эффективность белка KISS1 в строме децидуального эндометрия  отличий не выявлялось. Одновременно, было отмечено значимое увеличение диаметра экспрессии белка KISS1 в данных группах по сравнению с 12 неделями. Слабовыраженная экспрессия белка KISS1 в строме  децидуального эндометрия и ворсинах хориона указано на рисунке 17.
В результате нашего исследования было показано, что в ворсинах строме децидуального  эндометрия на сроке 7-8 недель эмбриогестации, увеличение экспрессии рецептора белка KISS1, было связано с пиком ангиогенеза и трофобластической инвазии. Невысокая экспрессия белка KISS1 в ворсинах строме децидуального эндометрия в группах сравнения характерна для нормально  протекающей беременности.


Рисунок.17.Невысокая эффективность белка KISS1 в строме децидуального эндометрия. Иммуногистохимическая реакция, х400.
Нарушение процессов адгезии и имплантации ведет к патологии  субплацентарной зоны и негативно влияет на развитие беременности, и может приводить к ее прерыванию на 1-триместре беременности.





.......................