Профилактика инфекционного бронхита кур в ЗАО «Приосколье»

Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

Федеральное государственное образовательное бюджетное учреждение

высшего образования

«Белгородский  государственный аграрный  университет  имени В.Я. Горина»

	

	Факультет ветеринарной медицины

	

	Кафедра инфекционной и инвазионной патологии

	



						Допустить к защите

						Заведующий кафедрой



						_______Мерзленко Р.А.

(подпись)                                      (Ф.И.О.)

						“____”___________ _______ г.		



ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА





Профилактика инфекционного бронхита кур в ЗАО «Приосколье»

(тема ВКР)





Вид выпускной квалификационной работы

                  дипломная работа                     .

(дипломная работа, дипломный проект)

	

	

	Направление/специальность подготовки

	                36.05.01 – ветеринария              .

	(код и наименование направления/специальности)

	

	

	Квалификация                          ветеринарный врач                                                .

(наименование квалификации в соответствии с ФГОС ВО)



						Студент: 

						Ерохина Н.. 53 группа

                                                            (Ф.И.О., № группы)          

                 (подпись)



						Научный руководитель: 

					         к.б.н., ст. преподаватель Жеребненко С.В. _________					 (учёная степень, учёное звание, Ф.И.О.) 	

(подпись)

Майский 

2017







Работа написана мною самостоятельно и не содержит неправомерных заимствований



__________________				______________________

(дата)								(подпись)















Текст ВКР размещен в электронно-библиотечной системе университета



Руководитель отдела комплектования библиотеки ____________________________

(Ф.И.О.)



__________________					___________________________

(дата)									(подпись)

























Коэффициент оригинальности ВКР________ % .



Проверил: _____________________________________________________________

(Должность, Ф.И.О.)



__________________					___________________________

(дата)									(подпись)















СОДЕРЖАНИЕ

Введение

Раздел 

Обзор литературы

Характеристика возбудителя инфекционного бронхита кур.

Физико-химические свойства ВИБ и антигенная характеристика штаммов ВИБ.

Клиническое проявление инфекционного бронхита кур.

Серологическа диагностика ИБК.

Изоляция и культивирование ВИБ.

Специфическая профилактика ИБК и иммунитет.

Заключение

Раздел

Материалы и методы

Раздел

Эпизоотический мониторинг птицеводческого хозяйства ЗАО «Приосколье» Белгородской области.

Результаты иммунизации цыплят относительно ИБК по данным сероконтролю.

Оценка иммунологических показателей крови цыплят, иммунизированных ИБК.

Оценка биохимических показателей крови цыплят.

Изоляция штамма вируса инфекционного бронхита.



Раздел

Обсуждение полученных результатов

Выводы

Список использованной литературы



4



6

6



7

8

9

12

14

20



22





25





32



35

37

41

46



48

54

55



Введение

Актуальность темы. Распространение и значительные экономические убытки от ИБК вызывают необходимость постоянного мониторинга этого заболевания и оптимизации схем вакцинопрофилактики ИБК. 

На сегодня, в период отсутствия конкурентоспособных кроссов птицы и с завозом молодняка в РФ, появилось много вирусных заболеваний, которые ранее не встречались на нашей территории: болезнь Гамборо, инфекционный бронхит, реоинфекция, вирусный энцефаломиелит птиц, и тому подобное.

Одной из актуальных проблем в птицеводстве остается выбор оптимальных программ иммунизации птицы по ИБК.

Инфекционный бронхит птицы регистрируется во всех странах мира и вызывает значительные экономические убытки в промышленном и фермерском птицеводстве. Ход ИБК сопровождается респираторными и уремичными синдромами у цыплят и поражением герминативных органов у взрослой птицы, что приводит к устойчивому снижению производительности.

В последние годы ИБК сопровождается патологоанатомическими изменениями грудного мускула и желудочно-кишечного тракта у бройлеров. Появление новых патологических изменений в тканях и органах птицы, связанных с ИБК, свидетельствует о возникновении новых вариантов этого вируса.

Не смотря на широкое использование вакцин против ИБК, контроль заболевания осложняется из-за появления эпизоотических штаммов ВИБ, антигенно отличающихся от вакцинных штаммов, так как перекрестная защита между ними отсутствует. Формирование напряженного группового иммунитета в отношении ИБК зависит от определения оптимальной схемы иммунизации птицы и выбора вакцин, составляющей которых являются те штаммы ВИБ, что по своим свойствам родственные штаммов, циркулирующих среди птиц в регионе.

Отсутствие постоянного мониторинга за состоянием иммунной системы птицы обуславливает введение в программы вакцинаций лишних вакцин, супресивно действуют на иммунитет. Необоснованное использование таких схем является составной частью создания нестабильной эпизоотической ситуации не только в ИБК, а и к другим заболеваниям.

Цель и задачи исследований

Целью исследований было провести эпизоотический мониторинг в птицеводческом хозяйстве, вакцинопрофилактики  поствакцинального иммунитета птицы по ИБК.

Для реализации цели были определены следующие задачи:

1. Провести эпизоотологический мониторинг инфекционных болезней сельскохозяйственной птицы в птицеводческом хозяйстве Белгородской области РФ.

2. Определить эффективность иммунизации цыплят в 1-дневном возрасте.

3. Оценить биохимические показатели крови цыплят против ИБК в птицеводческом хозяйстве ЗАО «Приосколье».

Объект исследования – эпизоотический процесс при ИБК, динамика формирования специфического иммунитета относительно ВИБ.

Предмет исследования – куры, эмбрионы, вакцина, вакцинопрофилактика и контроль ее эффективности.

Методы исследования. Для определения уровня материнских антител в сыворотке крови цыплят, а также определения уровня поствакцинального иммунитета титра гемаглютининов в экстраембриональной жидкости использовали серологические методы: РНГА, РГА, РЗГА.











РАЗДЕЛ

Обзор литературы.

Характеристика возбудителя инфекционно бронхита кур.

Инфекционный бронхит кур (ИБК) – высококонтагиозное заболевание кур, течение которого сопровождается респираторными, нефрозо-нефритными и репродуктивными синдромами. 

Заболевание влечет за собой значительные экономические убытки промышленном птицеводству во всем мире, связаны с высоким процентом гибели молодняка и стойким снижением продуктивности у взрослой птицы до 20% [1-7].

Впервые вирус инфекционного бронхита [ВИБ] кур был изолирован Бичем и Шалком в США в 1936 году [8, 9].

Возбудитель ИБК-типичный представитель Семейства Coronaviridae и относится к роду Coronavirus. Род Coronavirus вмещает вирус синюшной болезни индеек (Turkey bluecomb disease virus) и вирусы, вызывающие заболевания у животных и человека [10, 11].

Морфология и химическое строение ВИБ.

Вирион сферической формы, диаметр которого 80-160 мкм. Геном ВИБ представлен одноцепочечной РНК с молекулярной массой 5,5х106 [11].

В состав вириона входят 4 структурных протеина: нуклеокапсидний фосфопротеин (N), интегральный мембранный (М), поверхностный (S) гликопротеин и минорный протеин оболочки (E или sM) (12). Гликопротеин S состоит из двух субъединиц: N-концевой S-1 и С-концевой S-2 [8, 12, 13]. Белки S,M и N ВИБ имеют молекулярную массу 84-87, 90-91та 27-30 кДж соответственно. На первой и третьей четвертях S-1 белка эпитопы вируса локализованы в первых 300 аминокислотных остатках пепломерного S - белка [13]. Белки вирусов различаются по тканевым тропизмам. Изменение патогенности штаммов вируса связана с изменением изоэлектрической корки белка, поэтому классификация белков по этой методике позволяет проводить идентификацию высокопатогенных и персистентных штаммов [14].

Физико-химические свойства ВИБ и антигенная характеристика штаммов ВИБ.

Штаммы ВИБ кур различаются по терморезистентности, более шести которых инактивируется при 56°С за 10 минут. Все штаммы ВИБ резистентные к рН 11,0. По чувствительности к эфиру и прогреванию при 45°С в течение 90 минут штаммы различаются и разделяются на 3 группы. К первой группе относятся штаммы ВИБ, чувствительные к обоим обработкам, во вторую группу входят 6 штаммов, которые относительно резистентны к эфиру, но чувствительны к нагреванию при 46°С и к третьей группе относятся штаммы В-41 и КН, что не чувствительны к одной из обработок. ВИБ инактивируется через 18-24 часа под воздействием УФ излучения, за 3 часа под солнечным излучением, через 3 минуты под воздействием 70% этилового спирта, раствора соды 1:10000, 1% раствора формалина, фенола, крезола.

Вирус не теряет инфекционную активность в 50% растворе глицерина, при t+4°С до 80 дней, в аллантоисной жидкости при t 35°С - 3 дня, при t - 30°С вирус сохраняет инфекционность 17 лет.

Вирус ИБК имеет высокую генетическую вариабельность. В связи с этим определены 7 серотипов : А(Д 207), В(Д 3869), С( Д 3128), Д(Д 212), Массачусетс, ИК 11, ИК 12 [14, 15, 16].

В пределах этих серотипов существуют такие штаммы: Массачусетс 41, Коннектикут А 5968, Айова 97, Айова 609, Грей, Хольт и другие [17, 18, 19, 20].

Изолированные в 1991-93 гг. в Англии 12 штаммов ВИБ имеют нуклеотидную  идентичность на 79-90 %, тогда как штамм Д 274 и Н-120 только на 49-80%. Десять французских штаммов на 94-97% идентичные с британскими изолятами. Выделенные в Китае штаммы аналогичные к  штаммам Грей и Хольт, выделенных в США, является нефропатогенными, при этом штамм Н-95 поражает железистый желудок [21, 22, 23].

В 1999 г. в Китае были обнаружены новые варианты ВИБ, схожие по свойствам с серотипами М-41, Д 274, Д 1466, Д 3128 и с нефропатогенным Д 8880 [24, 25].

За последние 3 года в Китае выявлено распространение штаммов, которые по генотипу отличаются от таких: Тайваньской группы 2, шт. Массачусетс. Между Н-120 идентичность обнаружена на 51,8 - 58,3%, между другими на 42,0 - 53,4%, а с штаммов Тайваньской группы на 82,9 % [43, 51, 53, 54].

С помощью фингерпринтного анализа нуклеотидов РНК датских штаммов были выявлены 2 группы вирусов. В 1-ю группу вошли штаммы Н-52, Н-120, Д-387, 1259, 1385, 1394 в которых выявлено 99% гомологии, а до 2-й группы штаммы Д 207, Д 212, Д 1466, Д 3138, Д 3896, которые имеют 95% гомологии.



Клиническое проявление инфекционного бронхита кур

Клиническое проявление заболевания зависит от вирулентности вируса, общей резистентности организма и возраста птицы в период заражения. Наиболее остро заболевание проявляется у цыплят до 30-дневного возраста. Инкубационный период составляет 3-10 дней [5, 6].

Уже через 36-48 часов после интратрахеального инфицирования у цыплят появляется тяжелое дыхание, чихание. В результате закупорки носовых ходов, скопление серозно-слизистого экссудата в трахее, бронхах и воздухоносных мешках в грудной клетке появляются хрипы.

У цыплят, старше 30-дневного возраста, заболевания регистрируется в более легкой форме, но довольно часто осложняется колибактерозом, пастереллезом, микоплазмозом.

У взрослой птицы ИБК протекает с признаками незначительного повреждения органов дыхания. При этом в результате поражения герминативных органов, яйценоскость снижается на 30-40%, появляется деформированное яйцо с неровной, с перетяжками, скорлупы [9, 10].

Различные штаммы ВИБ поражают ещё почки и желудочно-кишечный тракт. Винтерфильд и Хитчер в 1962 году впервые сообщил о нефрозе, связанном с ВИБ. 

ИБ нефрит поражает в основном цыплят-бройлеров, но случается и среди кур – молодок и кур – несушек. У бройлеров заболевание начинается с признаков респираторного характера. Через 5-7 суток резко возрастают показатели гибели птицы. На протяжении 10-дневного периода гибель составляет от 5 до 25% поголовья. У цыплят регистрируют обезвоживания, а прямая кишка наполнена большим количеством уратов. Паренхима почек у больной птицы бледная, раздутая, пятнистая, канальцы и уретра раздутые от наполнения кристаллами мочевой кислоты [17, 23, 30, 32]. Повреждение почек у кур-молодок, в начале яйцекладки, указывает на то, что заболевание начинается на последних стадиях выращивания и прогрессирует, как только птица начинает выкладывать яйца. 



Серологическая диагностика ИБК.

Большое количество серотипов ВИБ, появление новых изолятов вируса, которые способны вызывать заболевания у вакцинированной  птицы, определяют необходимость дальнейшего усовершенствования методов идентификации штаммов дифференциации вируса.

Идентификацию ВИБ проводят с помощью РН, РДП, РЗГА, РСК, РНГА, ИФ, ЭМ, ИФА, ПЦР, ДНК-зондов и прочее [36, 38, 40].

Wit Y. Y. de, Mekkes D. R.[33,34] тестировали сыворотки крови цыплят, которых в однодневном возрасте аэрозольно вакцинировали штаммом Н-120 и через 48 дней инфицировали ВИБ (шт. М-41, Д-274, Д 1466 и Д 8880), с помощью РПГА, РЗГА, двух коммерческих модификаций ELISA и РН. При этом в РПГА регистрировали кратковременный ответ на контрольное инфицирование специфичностью 100% и чувствительностью 40%. Отмечена чувствительность (от 11 до 55%) и высокая специфичность (98-100%) для обоих вариантов ELISA с сыворотками от невакцинированной птицы. Специфичность РЗГА колеблется от 55 до 100%. Чувствительность РН с сыворотками от невакцинированных цыплят была в пределах 20-100 %, а специфичность зависела от начального уровня антител. У вакцинированных цыплят уровень антител в РЗГА, РН и ELISA был на 50% выше, чем у невакцинированных. С помощью ELISA-теста авторы предлагают выявлять Ig M в сыворотке крови к ВИБ.

По данным Kaufhold C., Lohr Y. E. [36] при диагностировании сывороток крови птицы на наличие антител к различных серотипов ВИБ установлено тесная корреляция в обеих реакциях при использовании шт. Массачусетс 41/Н-52 и датских вариантов Д 274/ Д 207 Д 1466/ Д 212, что предоставляет возможность заменить РН для геммаглютинирующих вирусов ИБ – РЗГА, которая позволяет равномерно выявлять антитела к различных серотипов вируса наряду с РН [36].

В последние годы в диагностике ВИБ используют моноклональные антитела (МАТ) и с успехом применяют полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Lien et al. [42,43,44,45,46] впервые предложили для диагностики ИБК метод ОТ-ПЦР, которые амплифицировали фрагмент N-концевой доли S2 гена американских и японских изолятов ВИБ. Теперь в диагностике инфекционного бронхита используют праймеры на различные участки генома вируса.

Луговская Н.М. при проведении непрямого ИФА и блокирующего варианта Н-ИФА использовала синтетический полипептид – аналог фрагмента N - конечного участка пепломерного белка S2 вируса ИБК как антиген. При этом один изолят показал 43% ингибии в реакции с Р – S2 и не блокировал МАТ в реакции с вирусом. Второй изолят не ингибировал связывания МАТ с Г – S2 на 62 % с вирусом на 35 % [38].

Восемнадцать изолятов ВИБ, обнаружены в Италии и Польше в 1997-1998 гг. были проанализированы в РЗГА, РН и ПЦР с белком S-1 вируса ИБК. Четыре типа ВИБ (793/624/Я, В 1648 и шт. Массачусетс) были обнаружены в И, тогда как в Польше ал штамм 793/У.  исследованиями Kanya-I. , . и другие , что на протяжении одного , а также на протяжении  лет в Европе циркулировали  В 1648, 738 В.  624/Я был новым  ВИБ [13,14].

Wang C.,  B., Ostin F. W. сравнивали два метода: ииирующих  и ОТ-ПЦР в отношении вы ВИБ в эмбрионах цыплят,  были инфицированы шт. ѕѕ.41, Ark 99 и Mass 41/ 99.

В материалы от эмбрионов,  одновременно шт. Mass 41 и Ark 99 оба  были 100 % выявленных ПЦР. В ИФА 20%  были и для обоих штаммов и  80% положительные для шт. Ark 99. Два из 8 образцов,  от здоровых эмбрионов,  были  шт. Mass/Conn/Ark99 были  в ИФА и 4 из 8 были положительные ПЦР.  образом, ПЦР более , чем ИФА, особенно при  некоторых штаммов, но ИФА , чем ПЦР.

Для выявления ВИБ Wang-Zelin,  Li  использовали  и метод ДНК . После инфицирования РЭК шт. -120, Н-41, НК через  часа с помощью ДНК - , а в почках  инфицированных цыплят  12 часов РИ выявляли  ВИБ. Авторами подчеркивается р использованных  по индикации ВИБ.

Высокую , специфичность иммуногистохимического  по индикации ВИБ (нефропатогенного ) в почках  24 часа и в течение 20  РИ, доводят Wang-BaoAn, , Xu-YiMing, оптимальный  гипериммунной сытки составлял 1:100. По  Handberg K. J. N-ген ПЦР  ВИБ в 82 % цыплят, тогда как ИНС  в 60% случаев. Эта  была существенной.  вывод, что прямое  ВИБ в тканях трахеи ПЦР  чувствительный , чем ИНС. При этом с помощью ПЦР  установление разницы м типами ВИБ.

Впервые  РПГА для  ВИБ в алантоисной жидкости  J. J., Donairajan N. Присутствие  в исследуемых образцах  агглютинацией  антителами эритроцитов. Все  изолятов ВИБ давали  реакции с титром  и 1: 256. Контрольный  ИБК аглютинировал с  1:256, тогда как  контроль дал отрицательный  [50].

Быстрый изный тест выявления ВИБ в ванных тканях с  моноклональных антител был м Nagi S. .(192). Антиген ВИБ был обнаружен в хориисной мембране через 15  после инокуляции и в ираторном  цыплят через 96  РИ.

ИБК характеризуется иммунологиче перестройкой с морфо выраженной  трансформацией, увеличения  пиронинофильних клеток в евой бурсе и других  органах.  признаком ИБК являются  деструктивные процессы в  и верхних отделах  путей [7, 50].



 и культивирование ВИБ.

Для изоляции ВИБ от  птицы отбирают  с трахеи, гортани во  инкубационного  и при наличии острых  проявлений.

От погибшей  отбирают кусочки , почек, , смывы из бронхов, от  кур еще и яйцеводы.

Ramneek,  изучали культуральные  6-изолятов-ВИБ и 2-х  штаммов в культуре  цыплят. Выявлено  милиарной активности  трахеи в инфицирых культурах уже через 24  и полное отсутствие его  через 144 часа.  вируса  в течение 4-х пассажей и  106,68 и 107,74 . С помощью ELISA - теста  наличие ВИБ в цированой культуре  [29].

Клетки почки  цыплят и фибробласты  зародышей использовали в  индикации ВИБ в непрямом  флюоресциирующих л. Feng W., Chen D.  широкое  ИБК среди птицы в , Тяньзине, Шаньдуне, єе. Kinde H. провел  ВИБ на 10-дневных  кур, при этом характерные  выявлены в пятом . Биопроба на SPF-цыплятах  за собой  почек. До 1991  в Калифорнии не регистрировали ые штаммы ВИБ.

Для получения  вакцин по ВИБ K A. V., Cumming R. B. предлагают ию ВИБ между 5-м и 25-м  в зародышах кур при t 31°С.

Rodgers S. J.  ис для накопления ВИБ ку фибробластов 21-дневных  страусов. При помощи э микроскопии и РН было  наличие в  клеток короно.

Из почек и легких , с признаками ИБК, в провинции ань были  ВИБ: SA/B1, SA/B2 и 3. Для вирусной изоляции  куриные зародыши от SPF . По анализу арной активности  трахеальной культуры кур зародышей и физико-химических  доказана  одного из штаммов к шт. -41. Установлена идентичность 1- изолята к Т, а второго к сер М-41,  имел частичное  к шт. М-41 и Т.

Mukhopadhuay H. K.,  N.  регистрировали снижение  яйца на  %, изменение его цвета на  у птицы из 138 ферм.  ВИБ проводили из образцов , селезенки,  миндалин, яйцеводов на  дневных эмбрионах кур. На 3-х  установлено моноиию ИБК и на 18 регистрировали  с E. coli инфекции ИБК. У кур в бие проявляли творожистые  в трахеи, увеличение , атрофию .

Вирус-изолят Т-95 в  микроскопе имел  80-160 нм. Штамм ался  к хлороформу, рН 3,0, до 1 % трипсину и не  гемаглютинирующих .

Для выявления свойств х белков ВИБ Lui D. X. и  использовали культуру  Vero.

Wu-JanJong для  ВИБ использовал одноразовый  на куриных , после чего  культуру трахеи . Под воздействием ВИБ в культуре  регистрировали атрофию  и угасания милиарной .

По данным Bhattachajee P. S. 10  ВИБ, изолированных из кишечника , имели  клеток бурсы иус, почек, но некоторые не  в миндалинах.

Экспериментальная  с шт. К-34 ВИБ на  2,4 и 6-недельного возраста  наличие острой  у цыплят 2-х недельного . Высокие  антител обнаруживали  16 недели у цыплят нных в 4 и 6-недельном .

Изоляция  из трахеи 2 - и 6-ти  инфицированных цыплят из  и почек показала  титр  ИБ в тканях особенно 2-х  цыплят. Впервые  методика выявления виизующих антител в  у цыплят одновременно с  крови.

Wahi S. K.  7-месячных кур интратрахеально ВИБ.  патологоанатомические  в динамике: 35, 42, 49 и 56 дней.  увеличение и atretic  и вторичных ovarian , увеличение  mucopolisaharides и снижение  в lamina epithelialis це. ВИБ способствовал изменениям в  щелочной , кислой фосфатазы,  и succinic дегидрогеназы.



  профилактика ИБК и иммунитет.

Для  ИБК применяют  и инактивированные вакцины [5, 6, 17, 27].

 возбудитель ИБК имеет  количество серотипов,  по антигенной , при выборе вакцины  учитывать какой  вируса циркулирует в .

По данным  исследователей шт. Н-120  от заболевания другими  штаммами ИБК, в этом  нефропатогенними,  относятся к различным ам, поэтому его чаще всего  для профилактики ИБК [19].

 J. K. L., Smith H. W.,  M. B. определили, что атенуя вакцина из шт. Н-120  устойчивость цыплят к зального  штаммом E. coli Р 001 и  ИБК других серотипов.  эти штаммы использовали как , то они обеспечивали  к инфицированию E. coli и шт. ИСК  Массачусетс (VF69149), или  серотипа (HVI-116).

 шт. Н –120 и обеспечивает полную  цыплят после и инфицирования нефропатогенним шт. -52 " вируса ИБК и  размножение вируса в . При этом наблюдали  частичное улучшение,  применяли  из этих штаммов  ИБК нефрита, которые вы вирусом ИБК из серотипов,  от шт. Массачусетс 

В Великобритании в 1990-1991 гг.  тяжелое забо бройлеров, которое  вызвано шт.  (793 В) вируса ИБК. По м Cook et. Al. [13, 17] ни одна из  не защищала птицу от  этим .

Скутарь И.Г., Крецу И.С. в  году наблюдали  ИБК в Молдове, ассоциированного с СС-74 среди  170-220 дневного , реже регистрировали  форму среди  10-14  возраста. В таких  использовали вакцину с шт. Н-120 в 4-6  возрасте, вторую  проводили в  дневном возрасте и в  за 20-25 дней  яйцекладкой. В хозяйствах, где не  респираторную  ИБК птицу иммунизиро только перед  [22].

Некоторые   указывают на  ревакцинации родительского  бройлеров в начале  эмульсин-масляной инактивированной , что обеспечивает  цыплят при выводе с  титром антител в  крови и защита в  3-недели от .

Использование бивалентной  вакцины из шт. Массачусетс и  штамма молодкам,  первично -120 стимулирует напряженный  к шт. Массачусетс и вариантного  [30].

Castro A. E.  вакцинировать  в возрасте 7-10 , а ревакцинацию в 4-недельном . Племенную птицу нировать  3-4 месяца [17].

 выраженный иммунный  у 100 % цыплят получена при  в 3 недельном  живой вакциной из шт. -120, а в 16 недельном возрасте  эмульсин вакциной 

Для вакцинопрофилактики ИБК в  применяют не только  разных фирм, но и , что содержат несколько  вирусов [18, 19, 20].

 используют живую  против ИБК и НБ. В отношении  применения этой  в научной е существуют противоположные .

Ряд авторов [27, 28] утверждают, что  ИБК интерферирующий с вирусом НБ и  его активность.

 Nagi считает наоборот, что  НБ подавляет вирус ИБК при  их введении [8, 12, 13].

Испытания  поливалентной  вакцины против ИБК, НБ,  СС-76 показали наличие  уровня антител ко  вирусам,  содержит вакцина [10, 32].

 и эффективно применяется  против ИБК из штаммов -120 и Н-52  и ВГНКІ [6, 7, 26]. Вакцинация  вакцинами различных  обеспечивает накопления в  крови  антител широкого . За счет материнских  Ig G-класса молодняк ный к инфицированию  вирусом в первые 2-4  жизни [15].

Иммунизация  до 10-дневного возраста в , или в отсутствии  антител, не обеспеч  эффективную резистентность  искусственного заражения  вирусом,  как вакцинация в 10-дневном  и позже обуславливает по защиту в течение 14  после  [14, 15].

Мулеманс Г., Т.П. Ван дер Берг  считают, что на эффективность  не влияет угнетение  антител, так как , что получала  и была вакцинана в 3-недельном возрасте  резистентной на  8 недель без высокого  антител.

Интраназальная или  иммунизация суточных  с наличием  антител штаммом -120 обеспечивает резистентность  трахеального инфицирования  штаммом вируса ИБК  Endo-Munos L. B., в исследованиях по  эффективности вакцинации  против ИБК, указывает на   четкой  и резистентности птицы к  ВИБ от наличия антител в  [29].

При определении  иммунизации  против ИБК и НБ некоторые  считают, что возможна  иммунизация с наработкой женного  на фоне мате антител, тогда как   рекомендуют планировать актическую , когда материнский  уже отсутствует. Поэтому  при определении сроков  против ИБК , когда вакцинный  будет конкурир с полевым.

Использование  вакцин  ВИБ и болезни Ньюкасла  с высоким уровнем  антител двукратно в  1 день и 3 , в сравнении с одноразовой  против ВИБ (Bronhopest ) в 3 суточном возрасте , что наиболее  является вакцинация с  водой в 3-суточном возрасте. При  определено, что материнские  способствуют  напряженного гуморального имму [15].

Поливалентная вакцина  ИБ, ССЯ-76,ИБК, НБ при иммуни кур 19-недельного , после предварительной  живыми вакцинами  болезни Марека, ИБК и НБ чила  напряженного иммунного  к 48-недельном возрасте.  яйца и производительность  на заданном , летальность птицы, без  либо признаков  составляла в этот  11,9%. Эти данные  при иммунизации птицы  3-х валентной вакциной  ИБК, НБ, ССЯ-76 [15].

 эффективность  против ИБК наличие в  Cryptosporidium bailey.  [162] инфицировали  2х106 oocyste Cr. b.и  2-х разовое инфицирование  ИБК в 4-и 14-дней после  Cr. b. Инфекция Cr. b. имела  действие на зм цыплят и способствовала шению чувствительности к ВИБ.

В научной  имеются сообщения о  in ovo против  Марека и иммунный  цыплят по ВИБ [16].

Pan-JuMin  трехвалентную гипериммунную с к вирусам: ИБК и НБ на  и довели ее эффек в ранней обработке  против этих  без проявления  аллергических реакций.  гипериммунной сыворотки против 3-х  значимых инфекционных  птицы  без существенных экономических  проводить профи особенно при смешанных  птицы.

По  [26, 27] существует корреляция  милиарною активностью и  изменениями, индуцированными  и незначительная  титрами антител и  иммунитета, но не выявлено  между показателями  и гуморального  у цыплят вакцинированных . При изучении гуморального  установлена корреляция  активности и  вируса из ткани [15, 16].

 связанная с клеточным  подтверждается реакцией  трансформации  и реакции этой  замедленного типа  Gillette K. Y. был изучен и отклик  на одноразовое введения ВИБ.  инокуляции штаммов : Массачусетс 41, Коннектикут 46 или  33 получено  постепенный прирост  антител и повышение  циркулирующих иммунных  и ?-глобулинов  крови. Класс , который продуцирует  первичный отклик  быть  с антигенной стимуляцией и  определенную посл продукции антител  Ig G и Ig М [49].

 Y. [14] при аэрозольной вакцинации  шт.Н-120 в 1, 14-и 20- возрасте обнаружил  уровень  на протяжении 19 дней  иммунизации 1-дневных  из-за наличии в них  антител. В 50- возрасте цыплят   шт. М-41. Наблюдали  защиту птицы, но не  корреляции  уровнем антител и . Вакцинация в 14 и 20 дней не  эффективной.

Вакцинация in ovo  ВИБ вакциной -120 и Iboral способствовала  антител на 15-й  после инокуляции к шт.  5,1 log, шт. Н-120 - 4,2 log по  с контролем (2,7 log).  незначительную поствакцинальную  в респираторном тракте и  вывода на 1,2%  вакцинации Н-120 [15, 25].

 H., E. Reyer применил  из шт. Н-120 и шт. Н-52  для цыплят 10 и 23- возраста, соответственно.  4 недели в обеих  птиц  регистрировали  (в РЗГА) 7,76 и 9,33 log 2 и 6,4 и 5,7 %  тесты в РИД. После инфицирования  2 месяца штаммом -41 птицы, что была ирована,  средний титр 7,04 2 (29,9 % в РИД позитивных), а  3 недели титр  снизился до 6,29 2 (8,7% РИД+). В  период в контрольной  птицы титр ан составлял 9,45  РИД+) [25].



Заключение

 научной литературы вует об актуальности  ИБК, что приводит к  экономическим убыткам в  птицеводства.

Появляются  штаммы, которые  повреждения не  респираторного тракта и  органов птицы, но и  нефрозонефриты, поражения  мускула у . Антигенная вариабельность ВИБ  искать новые  к диагностике и специфич профилактике  заболевания. 

Программы  ИБК и других инфекционных  несовершенны, хотя и  с использованием, как , так и инактивированных вакцин,  на современном научном . В научной литературе  много  данных относительно  и методов применения . Акцентируется внимание на  материнских  к ВИБ на эффективность иммунизации и  поствакцинального иммунитета.

 эффективности вакцинации  по ВИБ осуществляется с  различных серологических, , иммунологических тестов,  исследований, которые  полное  о механизмах иммунного  на введение вакцинного  ВИБ, но не в полной мере  в производственно -  практику.

Разработка  программы профилактики ИБК,  эпизоотологический мониторинг в , внедрение  методов контроля  вакцинации являются  направлениями в решении  проблемы. 





















































Р

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ 

2.1. Материалы и методы .

Работа выполнена на  хозяйстве ЗАО «» Белгородской области.  проводили с целью : эпизоотической ситуации по ИБК в  хозяйстве с  специализацией, эффективности  вакцинопрофилактики, что применяются и  этих схем.

Для  эпизоотического  птицеводческого а проводили анализ  ветеринарно-санитарных и специальных  по охране  от заноса инфекции и  от заболеваний различной , схем вакцинопрофилактики, что . В исследованиях  условия кормления,  птицы, в зависимости от  продуктивности, клиническое , патологоанатомические  у погибшей и вынужденно  птицы.

Схемы .

С целью определения  вакцинации  ВИБ на иммунную систему и  показатели крови  в зависимости от наличия  антител,  сформированы группы 1- цыплят, по 25 голов в . Опытные группы  содержали в  помещениях. Кормление  осуществляли соответствующим  птицы комбикормом.  одновременной  цыплят в 1-суточном  относительно ИБК, БН, БМ определяли в , проведенном по такой . 

Вирусологические 

Для изоляции вируса  бронхита был отобран ический материал от  240-дневного  в период снижения  на 20%, появления обесцвеченных яиц, ых и без скорлупы.

От погибшей и убитой  отбирали селезенку, , яйцеводы, фолликулы, . Патологический материал для  изоляции  по общепринятой методике.  контроля на отсутствие  и грибковой контаминации, на  питательных , исследуемый материал  на ХАО куриных эмбрионов 9 - и 11- инкубации в дозе 0,2 см?.  зараженных  проводили при температуре ?С и влажности 75% в течение 5 . Овоскопию эмбрионов как , так и инфицированных,  1 раз в сутки. 

Биологические 

В экспериментах по изоляции са инфекционного бронхита, ванию  ВИБ были использованы  эмбрионы 9 - и 11- инкубации, от родительского  птицы породы  коричневый,  от инфекционных заболеваний.

 схем вакцинации  на цыплятах в количестве 150 , возрастом от 1 до 45 . 

Серологический мониторинг  заболеваний птицы и   поствакцинальных антител с  РНГА, , проводили на поголовье  242000 голов  возрастных групп в .

Вакцины

1.  вакцина против ИБК и  Ньюкасла, содержащий                106 50 шт. Ла-Сота вируса  Ньюкасла и 103 50 шт. H-120 " вируса  бронхита кур,  производства . Вакцинацию цыплят 1- возраста  спрей-методом. 

2. Живая  против болезни , содержащая 1000 доз.  изготовлена в  фибробластов эмбрионов SPF,  Германия. Вакцинацию  проводили введением 0,2 см3  подкожно в  треть шеи.

3. Живая  против инфекционного  кур, содержащую 1000 доз 106 50 вируса ИБ, шт. -120, изготовленная на SPF эмбрионах.  №980406 от 10.2000.  цыплят проводили по  методом .

Серологические исследования.

 непрямой гемагглютинации.

 ставили с использованием  диагностикумов.  уровень поствакцинальных и инфекционных  по ВИБ, БМ, БН.

РНГА по выявлению  материнских  в желтке кур ставили . Предварительно делали  желтка в физиологическом  1:2.

Реакция 

Для индикации ВИБ в экстра  жидкости инфицированных КЭ   РГА.

С нормальной алантоисной  наблюдали  агглютинацию в титре 1:4. 

 задержки гемагглютинации

 РЗГА использовали с  выявления  поствакцинальных антител в  крови цыплят и кур.

 методы

Статистическая  полученных  проводилась на компьютерном  с помощью электронных  Microsoft в приложении  ХР Professional.



















Результаты исследований

3.1  мониторинг птицев хозяйства ЗАО «Приосколье»   области.

В  с отсутствием племенной  в РФ и массовым завозом ее  рубежа существенно  эпизоотическая  в птицеводстве. Одновременно  ухудшилась работа  биофабрик по производству  необходимых для  препаратов и вакцин.

 поставки племенного  и инкубационного яйца  границы от  и родительских стад,  живыми и инактивированными , которые применялись для  благополучия в  отношении регионов, но  не использовались в РФ, из-за  показаний, обусловило  завоз на  РФ и введение в программу  живых вакцин.  утеряна единственная  система  регионов от племенных  до товарных птицехозяйств.

 большого количества  иммуносупресс повлияло на иммунное  птицы. Особенно  отметить негативное е вакцин  болезни Гамборо,  чего регистрировали  формирование группового  иммунитета к ИБК и  вирусов. В результате  в птицеводческих хозяйствах  отмечали проявление ИСК, что  устойчивое  яйценоскости до 20%, выбраковку , связанную с развитием иосальпингитов, задержки  в яйцеводах, .

Вакцинопрофилактика по ИБК в птицехозяйствах  осуществляется посредством  и инактивированных вакцин  фирм-производителей, и  содержат штаммы:  Н-120, Ма-5,  Введение большого  вакцинаций  ИБК и нового штамма  объясняется ориентацией  иммунизации птицы на те, что  хозяйства-поставщики  птицы. Необоснованное  таких схем  составной частью  нестабильной  ситуации не только в ИБК, а  к ИЛТ, энцефаломиелита, реовирусной . Анализ эпизоотической  в птицеом хозяйстве ЗАО «Приосколье», , что ИСК в основном регистрируется у  кроссов.

Проведение  анализа  поствакцинального иммунитета по  сероконтроля осложняется  таких исследований  в полном  с целью экономии .

На сегодня разработана  контроля за уровнем  иммунитета,  которой даст  прогнозирования развития  ответа на введение  штаммов по  схеме и проведения  с учетом этих .

По сравнению с 2014  на 1.01.2016  в области птицеводства  области сократилась  птицеводческих , которые  на промышленной основе. При  увеличилось количество  хозяйств, что затрудняет  за эпизоотической  в целом.

Повышение  продуктивности птицы в  хозяйстве  связано с  численности и  ветеринарно-санитарных правил на  отрасли птицеводства.

Но  с получением увеличение  продукта  остается проблема  благополучия птицы по  заболеваниям.

Для поддержания  эпизоотической  в птицехозяйствах региона  схемы вакцинопрофилактики,  складываются в зависимости от  продуктивности  и базируются на схемах  родительских стад, от  получается птица.  подход к  иммунизации создает  иммунный фон у птицы, в  чего, невозможно  из схем те  и штаммы, введенные, без  возникновения эпизоотий.

С  определения иммунного  птицы в  с разным направлением  и последующей коррекцией  схем нами был  серологический  по наиболее экономически-значимых . В ЗАО «Приосколье».......................