Антимикробная активность лекарственного растительного сырья, содержащего арбутин

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

ВИТЕБСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ОРДЕНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ







ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ



КАФЕДРА КЛИНИЧЕСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ







ДИПЛОМНАЯ РАБОТА

«АНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, СОДЕРЖАЩЕГО АРБУТИН»



Код специальности М. 04.01.00 «Фармация»







Исполнитель:

Студентка 5 курса 5 группы Чернова (Желубовская) Екатерина Петровна

научный руководитель:

к.м.н., доцент Моисеева Алеся Михайловна







Работа допущена к защите                                            Работа защищена с оценкой

«___»_______ 2017                                                      «___»_______ 2017

Зав. кафедрой                                                                  Члены комиссии

(подпись)                                                                          (подписи)







Витебск-2017

Реферат

Работа изложена на 31 странице, включает Х рисунков, 2 таблицы. При написании работы было использовано 14 литературных источников, 3 из которых на иностранном языке.

Ключевые слова:арбутин, антимикробная активность, бадан толстолистный, брусника обыкновенная, толокнянка обыкновенная, ВЭЖХ.

Объект исследования:культивируемое лекарственное растительное сырье – листья бадана толстолистного, дикорастущее – листья брусники обыкновенной и листья толокнянки обыкновенной, заготовленные в 2016 году в национальном парке «Нарочанский».

Цель работы: изучение антимикробной активности лекарственного растительного сырья, содержащее арбутин.

Методы работы: турбидиметрический метод анализа, ВЭЖХ.

Результаты работы: в ходе работы обнаружена антимикробная активность экстракта, полученного из листьев бадана толстолистного, и не обнаружена – у экстрактов листьев брусники обыкновенной и толокнянки обыкновенной, а также был проведён хроматографический анализ полученных экстрактов, в результате которого определено количественное содержание арбутина в экстрактах.

Область применения: учебный процесс, разработка новой фармакопейной статьи на листья бадана толстолистного, разработка новых лекарственных средств.

Прогнозные предположения о развитии объектов исследования:ввиду отрицательных результатов о наличии антимикробной активности в листьях брусники обыкновенной и толокнянки обыкновенной, и небольшой активности – в листьях бадана толстолистного, требуется проведение дополнительных исследований.









Содержание

	Реферат	2

	ВВЕДЕНИЕ	3

		1.	Теоретическая часть	4

		1.1.	Арбутин	4

		1.2.	Фармакологические свойства арбутина	5

		1.3.	Качественное определение арбутина в ЛРС	6

		1.4	Количественное определение	10

		1.5	Лекарственные растения, содержащие арбутин	12

		2	Экспериментальная часть	23

		2.1	Материалы исследования	23

		2.2	Методы исследования	23

		3	Результаты исследований	25

		3.1	Результаты и обсуждения	25

		3.2	Количественное содержание арбутина в лекарственном растительном сырье	27

		4	Список литературы	29

































ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы представленной работы связана с нарастанием удельного веса инфекционных заболеваний в патологии человека, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами. Появление штаммов микроорганизмов, обладающих активными системами защиты от лекарственных средств, привело к существенному снижению эффективности антибактериальной терапии и поиску новых фармацевтических субстанций и биологически активных веществ, обладающих антибактериальными свойствами.

Поэтому изучение антимикробной активности лекарственного растительного сырья не теряет своей значимости в течение последних нескольких лет. Использование сырья, содержащего биологически активные вещества с антимикробной активностью, способно в перспективе оптимизировать антибактериальную терапию.

Цель работы: изучение антимикробной активности лекарственного растительного сырья методом турбидиметрии.

Задачи работы:

Получение экстракта из лекарственного растительного сырья;

Определение антимикробной активности полученных экстрактов;

Качественный и количественный анализ полученных экстрактов;

Интерпретация результатов.

























Теоретическая часть

Арбутин

Арбутин(арбутозид) (риcунок 1) -  гликозид простых фенолов, состав С12Н16О7?? Н2О, (бета- D- глюкопиранозид), принадлежит группе арил-бета-гликозидов (производное гидрохинона). Молекулярная масса 272,25 г/моль.

Название по номенклатуре IUPAC: (2R, 3S, 4S, 5R, 6S) – 2 гидроксиметил-6- (4- гидроксифенокси)оксан-3,4,5-триол. Традиционные  названия: арбутозид, вакцинин, гидрохинон- ?-D- глюкопиранозид.





	Рисунок 1–Арбутин



Физические свойства: арбутин – горькое вещество, легко растворимое в горячей воде, растворим в этиловом и метиловом спиртах, ацетоне, этилацетате, а также в водных растворах гидрокарбоната и ацетата натрия.Нерастворим в хлороформе, диэтиловом эфире. Арбутин – оптически активное вещество. Кристаллизуется в виде длинных, шелковистых игл. Температура плавления- 170? С (по другим источникам – 199.5?С).

Химические свойства: с хлорным железом дает голубое окрашивание; при взаимодействии с разведенной серной кислотой арбутингидролизуетсяна глюкозу и свободный гидрохинон, а метиларбутин расщепляется на глюкозу и монометиловый эфир гидрохинона, оказывая слабое антибактериальное действие.

[5].

В значительных количествах накапливается в листьях и побегах толокнянки и брусники, в листьях груши, бадана толстолистного. Наряду с арбутином в этих растениях присутствует метиларбутин. Агликоном этих гликозидов являются соответственно гидрохинон и метилгидрохинон [11].

Фармакологические свойства арбутина

Арбутин  хорошо всасывается в тонкой кишке. Под влиянием ферментов кишечной микрофлоры, в частности кишечной палочки, происходит расщепление арбутина до свободного гидрохинона. Гидрохинон метаболизируется в печени.Из организма выводится с мочой  в видеконъюгатов с глюкуроновой и серной кислотами, моча при этом окрашивается в тёмно-зелёный цвет. Для достижения необходимого лечебного эффекта, богатые этим гликозидом растения необходимо использовать длительно и в достаточных количествах.

Применение растений, содержащих арбутин, показывает, что их лечебный эффект значительно выше, чем чистого арбутина, что связано с наличием в растениях дубильных веществ и флавоноидов. [5].

В опытах на кроликах было обнаружено, что арбутин снижает уровень сахара в крови.

Арбутин может быть источником повышенной канцерогенной опасности, хотя утверждают также, что арбутин снижает риск возникновения рака, но пока нет доказанных данных относительно реального риска онкологических заболеваний от применения препаратов арбутина [5].

Гидрохинон обладает мочегонным и антисептическим действием эффективен при воспалительных заболеваниях мочевыводящей системы.

С арбутином связаны антиоксидантные свойства растений, содержащих данный гликозид. Арбутин тормозит перекисное окисление линолевой кислоты(незаменимая жирная кислота) и обладает способностью нейтрализовать свободные радикалы в бесклеточных системах invitro.

В исследовании на добровольцах установлено, что арбутин на 43,5% уменьшал развитие пигментации кожи при ультрафиолетовом облучении. В связи с этим предлагается использовать отвары растений для отбеливания кожи в косметологии [5].

Качественное определение арбутина в ЛРС

1). К 1 мл водного извлечения из лекарственного растительного сырья прибавляют кристаллик сульфата закисного Fe, жидкость окрашивается сначала в сиреневый, затем темно- фиолетовый цвет, и наконец, образуется темно- фиолетовый осадок (арбутин).

2). К 1 мл водного извлечения из лекарственного растительного сырья (в фарфоровой чашке) прибавляем 4 мл раствора аммиака и 1 мл 10% раствора Na фосфорно-молибденовокислого в 10%- ной хлористоводородной кислоте; появляется синее окрашивание (арбутин)[11].

3). Тонкослойная хроматография:

3.1). Идентификация арбутина в листьях брусники.

Испытуемый раствор: К 0,5 г измельченного сырья (355) прибавляют 5 мл смеси из метанола Р и воды Р (50:50, об/об) и кипятят с обратным холодильником в водяной бане в течение 10 мин. Горячее извлечение фильтруют. Фильтр и пробирку промывают смесью из метанола Р и воды Р (50:50, об/об) и доводят до объёма 5 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения. 2,5мг арбутина Р растворяют в 5 мл метанола Р.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G Р.

Подвижная фаза: этилацетат Р – кислота муравьиная безводная Р -  вода Р (44:3:3, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: при температуре от 100°С до 105°С.

Проявление: пластинку опрыскивают раствором 10 г/л 4-аминопиразолона Р, затем раствором 20 г/л калия ферроцианида Р и проявляют в парах аммиака. Просматривают в дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора (таблица 1). На хроматограмме испытуемого раствора в верхней половине могут обнаруживаться и другие зоны[4].

Верх хроматографической пластинки



Зона красного цвета

(пирозид)

Зона красного цвета

(арбутин)

Арбутин:зона красного цвета



Раствор сравнения

Испытуемый раствор

Таблица 1 – Последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора листьев брусники.



3.2). Идентификация арбутина в листьях толокнянки.

Испытуемый раствор: К 0,5 г измельченного сырья (355) прибавляют 5 мл смеси из метанола Р и воды Р (50:50, об/об) и кипятят с обратным холодильником в водяной бане в течение 10 мин. Горячее извлечение фильтруют. Фильтр и пробирку промывают смесью из метанола Р и воды Р (50:50, об/об) и доводят до объёма 5 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения. 25мг арбутина Р, 25 мг галловой кислоты Р и 25 мг гидрохинона Р растворяют в метаноле Р и доводят до объёма 10,0 мл этим же растворителем.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G Р.

Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р – вода Р -  этилацетат Р (6:6:88, об/об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл раствора сравнения и 20 мкл испытуемого раствора в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: при температуре от 105°С до 110°С до исчезновения запаха растворителей.

Проявление: пластинку опрыскивают раствором 10 г/л дихлорхинонхлоримида Р в метаноле Р, затем раствором 20 г/л натрия карбоната безводного Р. Просматривают в дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора (таблица 2). На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны: две или три зоны синего цвета и несколько зон коричневого или коричневато-серого цвета[4].

Верх хроматографической пластинки

Гидрохинон:зона синего цвета

Галловая кислота:зона коричневатого цвета



Арбутин:зонасветло-синего цвета

Зона синего цвета

Зона коричневатого цвета



Зона светло синего цвета

(арбутин)

Раствор сравнения

Испытуемый раствор

Таблица 2 - Последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора листьев толокнянки.

Количественное определение

При количественном определении арбутина применяют химические (титриметрические) и инструментальные (спектрофотометрические и хроматографические) методы анализа.

Нормативно-техническая документация предусматривает количественное определение арбутина в листьях толокнянки и брусники. Метод определения основан на йодометрическом титровании гидрохинона, полученного после извлечения и гидролиза арбутина.

1). Титриметрическое определение арбутина:

0,500 г измельченного сырья (710) помещают в колбу вместимостью 100 мл, заливают 50 мл воды Р и нагревают, поддерживая слабое кипение, в течение 30 мин. Горячее извлечение фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл через бумажный фильтр, избегая попадания частиц сырья на фильтр. В колбу с сырьем повторно прибавляют 25 мл воды Р и кипятят в течение 20 мин. Горячее извлечение вместе с сырьем переносят на тот же фильтр и остаток на фильтре дважды промывают горячей водой порциями по 10 мл. К фильтрату прибавляют 3 мл раствора свинца (II) ацетата основного Р, перемешивают, охлаждают и доводят водой до объема 100,0 мл. Колбу помещают в водяную баню и выдерживают до полной коагуляции осадка. Горячую жидкость полностью отфильтровывают в колбу через бумажный фильтр, прикрывая воронку часовым стеклом. Охлаждают, к фильтрату прибавляют 1 мл кислоты серной Р, колбу взвешивают с точностью до 0,01 г и кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 ч, поддерживая равномерное и слабое кипение. Охлаждают до комнатной температуры, взвешивают, доводят массу колбы до первоначальной водой Р, и полностью отфильтровывают через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 мл. К фильтрату прибавляют 0,1 г порошка цинка Ри встряхивают в течение 5 мин.

Жидкость нейтрализуют натрия гидрокарбонатом Р(около 1—2 г) по красной лакмусовой бумаге Р, прибавляют еще 2 г натрия гидрокарбоната Ри после его растворения фильтруютчерез бумажный фильтр.

50,0 мл фильтрата переносят в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл воды Ри немедленно титруют из микро- или полумикробюретки0,1 М раствором йода до появления синего окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин, используя в качестве индикатора раствор крахмала, свободный от йодидов Р.

1мл 0,1 М раствора йода соответствует 0,01361 г арбутина. 

Процентное содержание арбутина в растительном материале X в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:

, где

VТ – объём 0,1 М раствора йода, израсходованного на титрование, мл;

Т – титр соответствия, г/мл;

f – факторэквивалентности;

m- масса навески сырья, г;

w – потеря в массе сырья при высушивании, %

Содержание арбутина в ЛРС регламентируется ГФ РБ том 2[4].

2). Инструментальные методы определения арбутина:

К 0,400 г измельченного сырья (355) прибавляют 50 мл воды Р и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Охлаждают и доводят водой Р до объема 250,0 мл. После оседания частиц сырья 5,0 мл извлечения переносят в делительную воронку, прибавляют 45 мл воды Р, 1 мл раствора 20 г/л аминопиразолона P, 0,5 мл раствора аммиака разведенного Р2, 1 мл раствора 80 г/л калия ферроцианида Р. После прибавления каждого ингредиента смесь перемешивают. Выдерживают в течение 5 мин, прибавляют 25 мл хлороформа Р и встряхивают. Органический слой процеживают в мерную колбу вместимостью 100 мл через ватный тампон, увлажненный хлороформом Р. Водный слой промывают хлороформом Р три раза порциями по 25 мл. Хлороформные извлечения объединяют и доводят хлороформом Р до объема 100,0 мл. Измеряют оптическую плотность полученного раствора при 455 нм, используя воду Р в качестве компенсационного раствора. 

Содержание производных гидрохинона в пересчете на арбутин в процентах рассчитывают по формуле: 



где:

 648 — удельный показатель поглощения арбутина;

 А — оптическая плотность полученного раствора; 

m — масса навески испытуемого сырья, г [2].

Лекарственные растения, содержащие арбутин

1). Брусника обыкновенная(Vacciniumvitisidaea,Vacciniivitis-idaeaefolia сем.-Vaccinaceae)

Ботаническа характеристика и макроскопические признаки сырья: Вечнозеленый кустарничек высотой от 5 до 30 см с ползучим корневищем, от которого отходит несколько прямых разветвлённых стеблей. Листья короткочерешковые, кожистые, эллиптические или обратнояйцевидные, на верхушке притупленные или слабовыемчатые с цельными или слегка за- зубренными, завернутыми вниз краями, длиной от 7 мм до 30 мм, шириной от 5 мм до 15 мм. Листья сверху темно-зеленые, снизу светло- зеленые с ясно заметными темно-коричневыми точками (железками). Запах отсутствует [2]. Цветки собраны в короткие верхушечные кисти (2-8), венчик колокольчатый, белый или розовый. Плод - ярко-красная шаровидная ягода с многочисленными мелкими семенами. Цветет в мае, плодоносит в сентябре.

Микроскопические признаки сырья. При просматривании листа с поверхности видны слегка извилистые стенки клеток верхнего и нижнего эпидермиса. Устьица только на нижнем эпидермисе, мелкие, окружены двумя околоустьичными клетками, расположенными параллельно устьичной щели (парацитный тип). На нижней стороне листа имеются железки, состоящие из многоклеточной ножки, постепенно переходящей в овальную многоклеточную головку с коричневым содержимым. На верхней стороне листа по жилкам встречаются редкие одноклеточные прямые или дуговидно изогнутые волоски с толстыми стенками и гладкой или слабобородавчатой поверхностью. В мезофилле содержатся редкие одиночные кристаллы оксалата кальция в виде призм[2].

Распространение и местообитание. По всей европейской части России, Кавказ, Дальний Восток, Урал, Сибирь. Основные районы заготовок - Беларусь, Сибирь, северные, северо-восточные и западные области России. Растет на бедных почвах, преимущественно в хвойных и смешанных лесах, реже на известняковых почвах, горах, нередко образует сплошные заросли. Предпочитает бедные кислые почвы разной степени увлажненности. Урожайность листьев зависит от типа леса, освещенности, местообитания, кислотности и увлажненности почвы.

Заготовка, первичная обработка и сушка. Сбор проводят ранней весной или поздней осенью: весной - до цветения, поздней осенью - при полном созревании плодов. Листья, собранные летом, при сушке буреют, ухудшается качество сырья. Листья собирают путем ощипывания с куста, срезания ножницами или аккуратного обламывания надземных побегов, с которых после сушки листья легко отделяются. Повторные заготовки на том же участке допустимы только через 5-10 лет, после полного восстановления зарослей.Растение размножается вегетативно - корневищами, и при их повреждении гибнет. Сушат, рассыпав тонким слоем, в хорошо проветриваемом помещении, оберегая от прямых солнечных лучей. В сушилках с искусственным обогревом температура не должна превышать 35-40°С. После высушивания сырье перебирают, удаляют поврежденные, почерневшие и побуревшие листья, а если необходимо, удаляют веточки.

Испытания (Числовые показатели)сырья.

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырьевые части растения: листья, побуревшие и почерневшие с обеих сторон, — не более 7% (из-за несоблюдения сроков заготовки или режимов сушки сырья); другие части растения — не более 1%. Органические примеси: не более 1%. Минеральные примеси: не более 0,5%. 

Потеря в массе при высушивании (2.2.32). Не более 13,0%. 3,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до 105°С. 

Общая зола (2.4.1.6). Не более 7,0%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 0,5%[4].

Качественные реакции. Подлинность сырья устанавливают по присутствию арбутина и дубильных веществ. Качественные реакции на арбутин проводят смешивая водное извлечение из сырья с 10%-ным раствором натрия фосфорно-молибденовокислого в кислоте хлористоводородной – появляется синее окрашивание, а также при смешивании водного извлечения и кристаллика закисного железа, при этом постепенно образуется темно-фиолетовый осадок арбутина; на дубильные вещества - с раствором железоаммониевых квасцов - черно-зеленое окрашивание (дубильные вещества пирокатехиновой группы).

Химический состав. Арбутинане менее 4,5% (листья); не менее 4% (побеги), метиларбутин, дубильные вещеста, флавоноиды, урсоловая, винная и эллаговая кислота. В плодах содержатся сахара (до 10%), витамин С, флавоноиды, органические кислоты (2%), арбутин, микроэлементы.

Хранение. В сухом помещении, упаковав в мешки. Срок годности листьев 3 года.

Фармакологические свойства. Листья брусники оказывают антимикробное, вяжущее и противовоспалительное действие, обусловленное наличием в растении фенольного гликозида арбутина, а также урсоловой кислоты и фитонцидов. Препараты обладают вяжущим и капилляроукрепляющим свойством благодаря содержанию в них флавоноидов, витаминов, урсоловой кислоты и дубильных веществ, а также оказывают деминерализующее действие, повышают эффективность антибиотиков, стимулируют фагоцитоз и другие защитные силы организма.Водный экстракт листьев обладает незначительным гипогликемическимдействием. Листья брусники стимулируют выведение с мочой остаточного азота, мочевины, креатинина как в результате мочегонного эффекта, так и вследствие анаболического действия гиперина (гиперозида).Препараты листьев брусники усиливают желчеотделение. 

Противопоказания. При гиперацидных гастритах, при гипотонии. Сырые ягоды не следует употреблять при патологиях слизистой оболочки желудка или кишечника, а также при почечной недостаточности.

Лекарственные средства. Отвар листьев.

Применение. Листья брусники применяют при мочекаменной болезни, пиелонефрите, цистите, простатите и гонорее как мочегонное, дезинфицирующее, деминерализующее и регулирующее азотистый обмен средство.Листья брусники по сравнению с листьями толокнянки содержат меньше дубильных веществ, не всегда полезных при заболеваниях почек, что следует учитывать при назначении листьев брусники больным с почечной патологией.Для усиления диуретического эффекта листья брусники назначают в смеси с другими растениями, обладающими мочегонными свойствами.При хроническом пиелонефрите в комплексной терапии применяют лекарственный сбор следующего состава: листьев брусники, травы крапивы, семян льна по 20 г, листьев березы, листьев толокнянки, травы хвоща полевого, корня солодки и одуванчика, плодов можжевельника по 10 г. Из 1 столовой ложки смеси растений готовят отвар в 200 мл воды. Назначают по 1/2 стакана отвара 3-4 раза в день, варьируя питьевой режим и количество жидкости в зависимости от общего состояния больного.Отвар и настой листьев брусники применяют при нефропатии и отеках беременных, при сахарном диабете у беременных, как вспомогательное средство при пиелонефритах у беременных и в послеродовом периоде.Ингаляции и аэрозоли отвара листьев брусники применяют в комплексной терапии при хронических пневмониях, бронхоэктатической болезни, бронхитах. Аэрозоли брусничного листа имеют отрицательный электрический заряд, также дающий лечебный эффект.При гастритах, энтероколитах, колитах, сопровождающихся поносом, применяют отвар брусничного листа по 1/2 стакана 2 раза в день или по 1 столовой ложке 4-5 раз в день. При сахарном диабете отвар принимают по 1 столовой ложке 3 раза в день.При ангине, стоматите, пародонтозе, авитаминозе, хроническом тонзиллите, гингивите, язвенных поражениях полости рта отвар брусничного листа назначают в виде полосканий (2 раза в день при хронических заболеваниях, каждые 2-3 ч при острых).При ревматизме, подагре, "шпорах", спондилоартрозе, артритах и полиартритах воспалительного и обменно-солевого происхождения отвар листьев брусники применяют как деминерализующее и мочегонное средство по 1/2 стакана 2-3 раза в день.Листья брусники в аптечную сеть поступают в упаковках по 100 г. В домашних условиях готовят отвар: 6 г листьев заливают 200 мл горячей воды и нагревают на водяной бане в течение 30 мин, доводят объем до 200 мл, настаивают 10 мин, процеживают. Принимают по 1 столовой ложке 4-5 раз в день.Ягоды брусники применяют при авитаминозе в свежем виде по 1/2 стакана в день, при гастритах с пониженной кислотностью в свежем и моченом виде, а также в виде брусничной воды. Свежие ягоды или сушеные плоды рекомендуют при длительном лечении химиотерапевтическими средствами для борьбы с дисбактериозом, защиты почечного эпителия от повреждающего действия медикаментов и повышения эффективности их. При мочекаменной болезни, пиелонефрите, цистите назначают ягоды брусники, сок и варенье. Применяют для утоления жажды у больных с высокой температурой в виде брусничной воды или сиропа.Сок из ягод, свежие ягоды показаны при гипертонической болезни, рекомендуют их также для улучшения остроты зрения. При туберкулезе и кровохарканье ягоды употребляют в смеси с толокном и медом. Брусничный чай и брусничную настойку издавна применяют при подагре, артритах.

2). Толокнянка обыкновенная (Arctostaphylosuvaursi,Uvaeursifoliа сем.-Ericaceae)

Ботаническая характеристика. Многолетний низкорослый вечнозеленый стелющийся кустарничек с деревянистым стеблем. Все растение напоминает бруснику. Листья очередные обратнояйцевидные, постепенно переходящие в короткий черешок, мелкие, кожистые. Беловато-розовые цветки напоминают бубенчики, которые собраны в короткие кисти. Плод - красная несъедобная мучнистая ягодообразная костянка. Цветет в мае-июне, плодоносит в августе-сентябре.

Распространение. Лесная зона европейской части страны, Западная Сибирь, Поволжье, центральные области, реже - Дальний Восток. Основные районы заготовок - Литва, Беларусь, Псковская, Новгородская, Вологодская и Тверская области. За последнее время выявлены заросли в новых районах: Красноярском крае, Иркутской области и Якутии.

Местообитание. Преимущественно в сухих сосновых борах с лишайниковым покровом (боры-беломошники) на песчано-известняковой почве, песчаных дюнах. Светолюбивое растение. Больших зарослей не образует. Для промысловых заготовок наиболее пригодны заросли на гарях, вырубках, посадках. Для развития необходимо наличие в почве микоризообразующих грибков. Продуктивность толокнянки в различных типах сосняков различна, например, в сосняках лишайниковых она составляет 15-20 кг/га, а в сухотравно-лишайниковых - 50-120 кг/га.

Заготовка, первичная обработка и сушка. Сбор листьев следует проводить в два срока: весной - до цветения или в самом начале цветения, осенью - с момента созревания плодов до их осыпания. Заготовку сырья с середины июня до конца августа производить нельзя, так как листья, собранные в это время, при сушке буреют и содержат меньше арбутина. При заготовке облиственные веточки «скашивают», отряхивают от песка и транспортируют к месту сушки.Благодаря наличию спящих почек толокнянка неплохо восстанавливается после заготовок, но с целью сохранения ее зарослей необходимо оставлять не менее 1/3 куртины нетронутой. Повторные заготовки на одном и том же участке следует проводить с интервалом в 3-5 лет в зависимости от категории заросли. Для заготовки побегов была разработана специальная машинка, но она не нашла применения.Перед сушкой удаляют отмершие бурые и почерневшие листья и различные примеси. Сушат на чердаках или под навесами, раскладывая облиственные веточки тонким слоем и ежедневно их переворачивая. Допускается искусственная сушка при температуре не выше 50°С. Высушенные листья с помощью обмолачивания отделяют от крупных стеблей. Для удаления пыли, песка, измельченных частиц листья просеивают через сито с отверстиями диаметром 3 мм.

Стандартизация. Качество сырья регламентируют требования ГФ РБ том 2 (стр.429)[2].

Охранные мероприятия. Не допускается обрывание веток и выдергивание растения руками. С целью сохранения зарослей необходимо чередовать участки сбора, используя один и тот же массив не чаще 1 раза в 5 лет.

Внешние признаки. По ГФ РБ - листья мелкие, с верхней стороны блестящие, темно- зеленые, с нижней стороны светлее, матовые, длиной от 7 мм до 30 мм и шириной от 5 мм до 12 мм. Листовая пластинка обратнояйцевидной или удлиненно-овальной формы, с гладким, слегка завернутым к нижней стороне краем, с очень коротким черешком, на верхушке закругленная, иногда с небольшой выемкой, плотная, кожистая. Жилкование перистое, с хорошо заметным с обеих сторон листовой пластинки сетчатым рисунком. Листья с верхней стороны с ясно заметными вдавленными жилками, шероховатые на ощупь. Запах отсутствует.Ошибочно могут быть собраны:

брусника - Vacciniumvitisidaea L. Листья у нее крупнее, овальной формы, на нижней стороне находятся железки, край слегка загнут вниз, сетчатость отсутствует, заметна главная жилка, а жилки второго порядка направлены косо вверх, она используется самостоятельно;

зимолюбка зонтичная - Chimaphylaumbellata (L.) Nutt. Листья крупные, обратноланцетовидно-клиновидные, суженные в короткий черешок, расположенные внизу в виде розетки. Жилкование перистое.

Качество сырья снижается из-за возможных примесей, побуревших или измельченных листьев и других частей толокнянки, органической примеси. Подлинность листьев определяется по внешним признакам.

Микроскопия. Исследуют измельченное сырье (355). От зеленого до зеленовато-серого или желтовато-зеленого цвета. Видны: фрагменты эпидермиса, состоящего из полигональных клеток, покрытых толстой гладкой кутикулой, с прямыми и довольно толстыми, иногда выемчатыми стенками; устьица крупные, округлые, аномоцитного типа, окруженные 5—11 клетками эпидермиса; редкие основания волосков расположены только на нижнем эпидермисе; фрагменты палисадной паренхимы с тремя или четырьмя рядами клеток неравной длины и губчатая паренхима; группы одревесневших волокон с обкладками клеток, содержащих кристаллы оксалата кальция в виде призм, их сростков и друз; редкие конические одноклеточные покровные волоски[2].

Числовые показатели. Арбутина, определяемого йодометрическим титрованием, не менее 6%; влажность не более 12%; золы общей не более 4%; золы, нерастворимой в 10%-ном растворе кислоты хлористоводородной, не более 2%; побуревших и пожелтевших с обеих сторон листьев не более 3%; других частей растения (веточек и плодов) не более 4%. Допускается не более 0,5% органической и 0,5% минеральной примесей.

Химический состав. Листья содержат от 8 до 25% (не менее 6%) гликозида арбутина (эриколин), метиларбутин, 30-35% дубильных веществ пирогалловой группы, свободный гидрохинон, урсоловую кислоту (0,4-0,75%), флавоноиды (гиперозид, кверцетин и изокверцитрин, мирицитрин, кверцитрин и мирицетин), хинную, муравьиную, аскорбиновую кислоты, небольшое количество эфирного масла. Листья толокнянки содержат 2,76% азотистых веществ на абсолютно сухую массу сырья, из них 57,5% относится к белковым веществам, включая незаменимые аминокислоты. В листьях толокнянки много йода (2,1-2,7 мкг/кг).Гликозид арбутин под влиянием фермента арбутазыгидролизуется на гидрохинон и глюкозу

Качественные реакции.Качественные реакции на арбутин (с сульфатом закисного железа или раствором натрия фосфорно-молибденовокислого в хлористоводородной кислоте), а также на дубильные вещества (с железоаммониевыми квасцами).Используется водный отвар листьев:

отвар (1 : 20) при взбалтывании с кристалликом закисного железа постепенно образует темно-фиолетовый осадок (арбутин);

отвар листьев толокнянки при добавлении раствора железоаммониевых квасцов дает черно-синее окрашивание (дубильные вещества группы пирогаллола).

Хранение. В сухом помещении, упаковав в мешки. Срок годности 5 лет.

Фармакологические свойства. Антисептическое действие толокнянки обусловлено гидрохиноном, образующимся в организме при гидролизе арбутина и выделяющимся с мочой. Моча при этом окрашивается в зеленый или темно-зеленый цвет. Мочегонное действие препаратов растения связано также с гидрохиноном. Дубильные вещества, содержащиеся в отваре толокнянки, оказывают вяжущее действие в желудочно-кишечном тракте. В экспериментах на крысах отвары толокнянки обнаружили свойства антигипоксантов: под влиянием введения толокнянки увеличивался процент выживаемости животных в условиях гипоксии.Толокнянка представляет интерес как естественный источник гидрохинона, который относится к веществам с лабильным водородом. Гидрохинон повышает активность окислительно-восстановительных реакций. В числе его многосторонних влияний находится способность блокировать О-метилтрансферазу и тем самым продлевать действие адреналина. При экспериментальных исследованиях гидрохинон оказывает выраженное влияние на метаболизм, поглощение кислорода тканями, содержание в крови глюкозы, калия, глутатиона, положительно действует на диабетический кетоацидоз, дает гипертензивный эффект в ряде экспериментальных шоковых ситуаций.

Лекарственные средства. Листья, отвар, брикеты. В состав мочегонных сборов входят листья толокнянки, цветки василька, корень солодки. Иногда вместо василька берут плоды можжевельника.

Применение. Отвар толокнянки применяют при заболеваниях почек и мочевыводящих путей (пиелонефриты, мочекаменная болезнь, циститы) по 1 столовой ложке 5-6 раз в день как дезинфицирующее и диуретическое средство. При приеме больших доз возможны рвота, тошнота, понос и другие побочные явления. Отвары и настои имеют неприятный вкус. Иногда в отвар для усиления мочегонного эффекта добавляют ацетат калия. Листья толокнянки несколько раздражают эпителий мочевыделительной системы, поэтому их комбинируют с растениями, оказывающими противовоспалительное, кровоостанавливающее и мочегонное действие.В аптеках продают резаную траву толокнянки в упаковках по 100 г. В домашних условиях из нее готовят отвар: 5 г листьев заливают 100 мл воды комнатной температуры, кипятят на водяной бане в течение 30 мин, процеживают. Отвар хранят в прохладном месте не более 2 сут.Листья толокнянки включают в мочегонные сборы. Под влиянием фитопрепаратов увеличивается диурез, усиливается фильтрация. При пиелонефрите применяют следующий сбор: листья толокнянки, листья березы, трава хвоща полевого, корень солодки по 10 г, лист брусники, семя льна, трава крапивы по 20 г. Для приготовления настоя 1 столовую ложку смеси заливают 200 мл кипящей воды, нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин, настаивают 1 ч. Принимают по 1/3 стакана 2 раза в день.

3). Бадан толстолистный (Bergeniacrassifolia (L.), Bergeniaecrassifoliaefolia, Bergeniaecrassifoliaerhizomata, сем.-Saxifragaceae)

Ботаническая характеристика. Многолетнее травянистое растение высотой до 50 см. Корневище толщиной 3,5 см, ветвистое, ползучее с корневыми мочками. Стебель безлистный, заканчивается метельчато-щитковидным соцветием. Цветки правильные, пятичленистые, лилово-розовые, лепестки венчика с ноготком. Листья в прикорневой розетке, сочные, "капустоподобные", цельные, голые, кожистые, блестящие, округлые, тупозубчатые, около 30 см в диаметре. К осени листья краснеют и зимуют. Плод - эллипсовидная коробочка с мелкими семенами. Цветет в мае-июле, семена созревают в июле-августе.

Распространение. Сибирь (Алтай, Саяны, Прибайкалье, Забайкалье). Растение ограниченного ареала. Как декоративное растение используют для озеленения населенных пунктов.

Местообитание. Растет в горном лесном поясе на высоте от 300 до 2600 м над уровнем моря на каменистых, скалистых почвах. Образует густые заросли иногда на сотнях гектаров. Растение введено в промышленную культуру, развивается медленно.

Химический состав. Корневища содержат до 28% дубильных веществ группы пирогаллола, полифенолы, изокумаринбергенин, крахмал. По ГФ РБ дубильных веществ должно быть не менее 20%. В листьях дубильных веществ до 20%, свободные полифенолы - галловая кислота до 22%, гидрохинон, арбутин. Содержание танина колеблется от 8 до 10%. В корневищах найдены производное изокумаринабергенин, аскорбиновая кислота, крахмал и сахара.

Хранение. В сухом месте, в хорошо упакованной таре. Срок годности 4 года........................